淡色库蚊氨肽酶N基因的克隆及生物信息学分析

发布时间：2017-09-09 04:37

  本文关键词：淡色库蚊氨肽酶N基因的克隆及生物信息学分析

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【摘要】：目的克隆淡色库蚊Bt毒素受体氨肽酶N(Aminopeptidase N,APN)基因,并对基因及编码蛋白进行生物信息学分析。方法提取淡色库蚊RNA,通过RT-PCR扩增氨肽酶N基因的全长cDNA序列,纯化PCR产物连接至pMD19-T载体,阳性重组质粒经PCR鉴定后进行基因测序。生物信息学分析APN基因的序列同源性及编码蛋白的结构特征。结果该基因cDNA序列全长为1 383bp(含终止密码子),编码460个氨基酸,与致倦库蚊XM_001862270.1序列的同源性为100%。预测蛋白质分子量为52.9kDa,等电点为4.98。前21个氨基酸为N-末端的信号肽,存在2个N-糖基化位点(93 NLT95和169 NVS171)。具有肽酶家族M1的序列特征、锌结合位点HEXXH和谷氨酸锌化氨肽酶的保守结构GAMEN。结论成功克隆了淡色库蚊氨肽酶N基因并对APN蛋白进行生物信息学分析,为进一步探讨淡色库蚊APN的功能及Bt毒素作用机制奠定了基础。
【作者单位】： 山东省医学科学院山东省寄生虫病防治研究所;
【关键词】： 淡色库蚊 氨肽酶N 克隆 生物信息学
【基金】：国家自然科学基金项目(No.81271877)~~
【分类号】：R384.1;Q78
【正文快照】： (Shandong Institute of Parasitic Diseases,Shandong Academy of Medical Sciences,Jining272033,China)淡色库蚊(Culex pipiens pallens)是我国北方入室吸血骚扰的主要蚊种,是班氏丝虫病和流行性乙型脑炎的重要媒介,严重危害人类健康[1-2]。生物防治是蚊虫防治的重要方法,

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3 李辉汉,樊天宝,胡玉祥,张鲁昌,苗有光,元素会,王家庆;山东农村淡色库蚊生态习性的调查研究[J];昆虫学报;1965年05期

4 王仁赉;光周期对淡色库蚊滞育越冬影响的观察[J];昆虫学报;1979年03期

5 陈巧云,姜家良,林国芳,刘维德;淡色库蚊对敌百虫抗性的研究——水解酶同敌百虫抗性关系[J];昆虫学报;1980年04期

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本文编号：818338