大鼠多器官成纤维细胞nanog蛋白的表达差异
发布时间:2017-11-18 10:21
本文关键词:大鼠多器官成纤维细胞nanog蛋白的表达差异
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【摘要】:背景成纤维细胞来源于胚胎组织中胚层,在组织中广泛分布,近年发现,外在损伤等微环境刺激可使其转变有功能的效应细胞;离体培养的成纤维细胞与骨髓间充质干细胞表面标志物类似,多向分化潜能逐渐被人们所认识,可作为细胞工程的种子细胞。然而正常器官的成纤维细胞是否均具有多潜能?不同器官成纤维细胞是否存在差异?离体培养的成纤维细胞的多潜能性与组织是否相同等,目前尚未见比较性研究。目的探讨新生大鼠和成年大鼠心、肝、脾、肺、肾和皮肤中成纤维细胞表达nanog蛋白差异及其意义。方法1.免疫组织化学法分别对新生大鼠、成年大鼠心、肝、脾、肺、肾和皮肤中的成纤维细胞进行vimentin标记,以对成纤维细胞进行鉴定;并对各组织成纤维细胞行nanog蛋白标记,比较不同器官中nanog阳性细胞的分布差异;2.免疫荧光双标技术分别对新生大鼠、成年大鼠心、肝、脾、肺、肾和皮肤中的成纤维细胞进行nanog和vimentin双重标记,检测并比较不同器官中成纤维细胞nanog蛋白表达比率。3.酶联合消化法体外分离培养新生大鼠6种器官中的成纤维细胞,在细胞水平进一步验证成纤维细胞表达nanog蛋白特征,并与组织相比较。结果1.在新生大鼠每个器官中均有少数成纤维细胞表达nanog蛋白,其表达率分别为心(10.07±0.77)%、肝(9.97±3.70)%、脾(11.23±2.98)%、肺(15.07±2.87)%、肾(11.75±2.76)%、皮肤(16.14±1.28)%,其中皮肤和肺的表达率高于心、肝、脾、肾(P0.05);而成年大鼠各器官很少表达nanog,只有肺、脾、肾存在少量表达,新生大鼠和成年大鼠比较,存在明显差异,P0.05。2.新生大鼠分离培养的成纤维细胞纯度较高,表达nanog蛋白的细胞数明显高于组织。结论1.新生大鼠和成年大鼠心、肝、脾、肺、肾和皮肤的部分成纤维细胞表达nanog蛋白,提示成纤维细胞具有幼稚性和多向分化潜能。2.不同器官nanog阳性成纤维细胞存在差异,随着年龄的增长,nanog阳性细胞数量逐渐下降。3.体外培养的成纤维细胞表达nanog的细胞数量高于组织水平,其原因尚不清楚。
【学位授予单位】:新乡医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R329.2
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,本文编号:1199453
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