HBsAg基因转化番茄及其表达

发布时间：2017-12-27 19:38

  本文关键词：HBsAg基因转化番茄及其表达　出处：《西北大学》2006年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：本实验将整合有乙肝表面抗原主蛋白基因(HBsAg)的植物表达载体pCAMBIA1301通过根癌农杆菌介导转化番茄,诱导出丛生芽并筛选转基因植株,检测目的基因的转化情况和表达情况。实验主要取得了以下进展: 1.将植物表达载体pCAMBIA1301/HB转化农杆菌LBA4404,利用利福霉素(Rif)和卡那霉素(Kan)筛选出转化子,经PCR和双酶切鉴定,质粒转化成功,携带该载体质粒的农杆菌命名为LBA4404/pCAMBIA/HB。 2.樱桃番茄幼苗外植体在MS+6-BA_(2.0)+IAA_(0.2)培养基中能很好的诱导分化丛生芽;以25mg/L的潮霉素(Hyg)为选择压力能高效筛选出抗Hyg转化植株;转化植株在1/2MS+Hyg_(25)生根培养基中生根正常,植株生长良好;经过炼苗后移栽花盆的存活率为100%。 3.用农杆菌LBA4404/HB浸染番茄幼苗外植体,以Hyg作为选择抗生物筛选出抗性转化植株,经PCR和Southern-blot检测证明所得转化植株全部为转基因植株。 4.粗提转基因植株的总蛋白,进行Western-blot和ELISA检测,结果证明目的基因HBsAg在番茄中正确表达,所表达的蛋白具有免疫原性。
[Abstract]:In this experiment, a plant expression vector pCAMBIA1301 with hepatitis B surface antigen major protein gene (HBsAg) was transformed into Tomato by Agrobacterium tumefaciens mediated transformation, and induced clustered buds and screened transgenic plants. The transformation and expression of target genes were detected. The main achievements of the experiment are as follows:
【学位授予单位】：西北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R392;S641.2

【引证文献】

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1 张艳婷;转HBsAg基因导致樱桃番茄突变体发生规律的研究[D];西北大学;2012年

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本文编号：1342945