单克隆抗体ZUC3免疫磁珠分选人骨髓间充质干细胞的方法研究
本文关键词:单克隆抗体ZUC3免疫磁珠分选人骨髓间充质干细胞的方法研究 出处:《浙江大学》2006年硕士论文 论文类型:学位论文
【摘要】:骨髓间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是骨髓组织中除造血干细胞外的一种非造血组织的成体干细胞。MSCs具有自我更新、高度增殖及多向分化的能力,在一定的体内或体外诱导条件下可以分化为各个胚层的细胞,如脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、肌腱细胞、肌肉细胞、神经元细胞、上皮细胞等。由于MSCs具有多向分化能力并易于在体外培养、扩增,且MSCs免疫原性弱、不表达MHC-Ⅱ类分子和T细胞共刺激分子,使异基因MSCs的应用成为可能,而使之成为细胞治疗和组织工程的研究热点。但正常人骨髓中MSCs含量极低,约10~4~10~5个单个核细胞中含有一个MSC,为得到足够数量MSCs应用于临床,需建立高效的体外纯化、培养和扩增体系。通过传统的贴壁培养的方法获得的原代人骨髓MSCs耗时长、细胞的异质性大,这使MSCs的基础研究及临床应用的推广受到限制。以细胞表面特异性表型为标记,通过免疫分选的方法,可以有效地富集骨髓中含量极少的MSCs,提高原代培养所得的MSCs纯度,以推动MSCs的应用研究。目前人骨髓MSCs公认的表型特征:CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166呈阳性,不表达造血干细胞的标志性抗原,CD14、CD34、CD45、HLA-DR、血型糖蛋白A(GlycophorinA)及T或B淋巴细胞的表面标记均为阴性。迄今为止,人们对MSCs
[Abstract]:Bone marrow mesenchymal stem cells (Mesenchymal Stem Cells, MSCs) are adult stem cells of non hematopoietic tissue except hematopoietic stem cells in bone marrow. MSCs has the ability of self-renewal, high proliferation and multilineage differentiation, differentiation of various layers of cells could be induced in vivo or in vitro under certain conditions, such as adipocytes, chondrocytes, osteoblasts, tendon cells, muscle cells, neuronal cells and epithelial cells. Because MSCs has the ability of multi-directional differentiation and is easy to culture and amplify in vitro, and the immunogenicity of MSCs is not strong, it doesn't express MHC- class II molecules and T cell costimulatory molecules, making the application of allogenic MSCs possible, and making it a research hotspot of cell therapy and tissue engineering. However, the MSCs content in bone marrow of normal persons is very low, which is about 10~4 ~ 10~5. There is a MSC in each mononuclear cell. In order to get enough quantity of MSCs for clinical application, we need to establish an efficient system for purification, culture and amplification in vitro. The primary human bone marrow MSCs obtained by traditional adherence culture is time-consuming and heterogeneous, which makes the promotion of basic research and clinical application of MSCs limited. Using cell surface specific phenotype as marker, immune sorting method can effectively enrich MSCs content in bone marrow and increase MSCs purity in primary culture, so as to promote the application of MSCs. At present, the MSCs phenotypes of human bone marrow are positive: CD29, CD44, CD73, CD90, CD105 and CD166 are positive. They do not express the marked antigens of hematopoietic stem cells. CD14, CD34, CD45, HLA-DR, blood group glycoprotein (CD90) and surface markers of lymphocytes or lymphocytes are negative. So far, people have been to MSCs
【学位授予单位】:浙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R329.2
【共引文献】
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