人体脂肪基质细胞的分离培养及其成骨活性的研究
本文选题：基质细胞 + 脂肪组织 ； 参考：《中国组织工程研究与临床康复》2007年37期
【摘要】：目的:脂肪组织来源的脂肪基质细胞具备向其他多种组织成分,如神经细胞、骨骼肌细胞、心肌细胞、软骨细胞、骨细胞等分化的能力。探讨人体脂肪组织来源脂肪基质细胞的分离培养方法及其成骨活性。方法:于2005-10/2006-05选取临床手术中收集的废弃脂肪组织及行脂肪抽吸术所得的脂肪组织为实验材料,采用机械切割及Ⅰ型胶原酶消化法从脂肪组织中分离获得脂肪基质细胞,原代培养后,以诱导培养基(内含10mmol/Lβ-甘油磷酸钠、10-8mol/L地塞米松、50mg/L维生素C)进行诱导培养。实验评估:应用形态学观察、碱性磷酸酶钙-钴法染色检测碱性磷酸酶,Von Kossa钙化结节染色检测钙化结节的形成等方法来鉴定诱导分化所得细胞的成骨活性。结果:行诱导培养的脂肪基质细胞呈多层成长,形态多为梭形、锥形或立方形,细胞外基质有白色钙化结节形成;细胞增殖速度减慢,生长周期变长。碱性磷酸酶钙钴法染色及Von Kossa钙化结节染色后均表现为阳性,未诱导培养的脂肪基质细胞则表现为阴性。结论:初步建立了一套由脂肪组织分离培养脂肪基质细胞的方法,并证明该细胞具备成体干细胞的特性,在体外诱导培养条件下具备向成骨细胞分化的能力。
[Abstract]:Objective: adipose tissue derived adipose matrix cells have the ability to differentiate into many other tissue components, such as nerve cells, skeletal myocytes, cardiomyocytes, chondrocytes, and bone cells. Methods of isolation and culture of adipose tissue derived fat stromal cells from human body adipose tissue and its osteogenic activity. Methods: a clinical operation was selected in 2005-10/2006-05. The adipose tissue collected from discarded adipose tissue and liposuction was used as experimental material. The adipose stroma cells were isolated from the adipose tissue by mechanical cutting and type I collagenase digestion. After primary culture, the induction medium (including sodium 10mmol/L beta glycerol, 10-8mol/L dexamethasone, 50mg/L vitamin C) was induced. Experimental evaluation: morphological observation, alkaline phosphatase and calcium cobalt staining were used to detect alkaline phosphatase, Von Kossa calcified nodule staining was used to detect the formation of calcified nodules and other methods to identify the osteogenic activity of the induced differentiation cells. A white calcified nodule was formed in the extracellular matrix; cell proliferation slowed down and the growth cycle grew longer. Alkaline phosphatase staining with calcium cobalt method and Von Kossa calcified nodules were all positive, and the uncultured adipose stroma cells were negative. Conclusion: a set of adipose tissue was isolated and cultured from adipose tissue at the initial stage. It is proved that the cells possess the characteristics of adult stem cells and have the ability to differentiate into osteoblasts in vitro induced culture conditions.
【作者单位】： 天津市第三中心医院骨科 天津市第三中心医院骨科 天津市第三中心医院骨科 天津市第三中心医院骨科 天津市第三中心医院骨科
【分类号】：R329
【参考文献】
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本文编号：1852051
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