《中国人民解放军军医进修学院》2010年硕士论文

发布时间：2016-11-22 10:19

  本文关键词：乌司他丁和胸腺肽α1联合治疗严重脓毒症的组织病理学观察，由笔耕文化传播整理发布。

《中国人民解放军军医进修学院》 2010年

Th17细胞在脓毒症中的作用机制研究

马劲夫  

【摘要】： 背景：Th17是新近发现的一种独立的辅助性T细胞亚群,以分泌IL-17为主要特征。该细胞在防御胞外细菌感染、介导慢性免疫炎症、自身免疫疾病以及肿瘤免疫中发挥重要作用。已证实IL-17与肺炎克雷白杆菌、啮齿枸橼酸杆菌、幽门螺旋杆菌、沙门氏菌、白色念珠菌、乙肝病毒以及寄生虫等病原菌所致感染的转归密切相关。但就目前研究现状而言有以下问题仍未解决：1、Th17在脓毒症发病中的免疫调节机制；2、单核细胞在脓毒症发病的免疫机制中占有核心地位,Th17与单核细胞的关系。 目的：探讨Th17在脓毒症发病中的免疫调节机制及与单核细胞间的相互作用关系。 方法：本实验共分四个部分 实验一：APACHEⅡ评分与脓毒症患者预后关系的研究 收集脓毒症患者体温、白细胞计数、C反应蛋白、动脉血乳酸、血糖等临床资料,统计学分析APACHEⅡ评分与预后的关系。 实验二：Th17在脓毒症发病中作用机制的研究 根据疾病严重程度,将脓毒症患者分为脓毒症、重症脓毒症与脓毒性休克三组。进行全血细胞刺激培养、胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测,Flowjo软件分析Th17表达频率。 实验三：单核细胞在脓毒症发病中作用机制的研究 按上述分组方法,对入组患者全血标本进行细胞染色,流式细胞仪检测,Flowjo软件分析单细胞亚群组成比例以及HLA-DR、CD14平均荧光强度。 实验四：单核细胞与Th17间的相互作用关系 分离健康人PBMC,在不同LPS浓度下进行细胞培养3天,随后进行细胞内因子染色与流式细胞仪检测,Flowjo软件分析Th17表达频率。 结果： 实验一：脓毒症患者APACHEⅡ评分与C反应蛋白、动脉血乳酸以及血糖呈正相关关系;APACHEⅡ评分与预后呈显著负相关关系(r=-0.667,P0.001)；三组脓毒症患者间APACHEⅡ评分均有显著性差异(P0.01)。 实验二：脓毒症患者Th17表达频率升高,较健康对照组差异显著(p0.01),Thl表达差异不显著(P=0.062)；按疾病严重程度分四组后,脓毒症组与重症脓毒症组间差异不显著(P=0.076),其余各组间均具有显著差异(p0.01),其中重症脓毒症患者Th17表达频率最高,脓毒性休克组频率最低；脓毒症患者Th17表达频率与APACHEⅡ评分呈负相关(r=-0.299,P=0.014)。 实验三：脓毒症患者单核细胞绝对计数较健康对照组升高(P0.05)；三组脓毒症患者CD14+CD16+亚群较正常对照组显著升高(P0.01)；脓毒症患者单核细胞HLA-DR、CD 14平均荧光强度均较健康对照组明显降低,并随着脓毒症患者病情由轻到重而逐渐下降,即脓毒症组重症脓毒症组脓毒性休克组。 实验四：加入LPS刺激的PBMC Th17表达频率较高,LPS浓度为20ng/m1时Th17表达频率最高为5.87%。 结论： 1. APACHEⅡ评分可以较好的反映脓毒症患者预后； 2.Th17在脓毒症发病的免疫机制中可能发挥重要作用； 3.激活的单核细胞可以促进Th17分化与扩增；CD14+CD16+单核细胞亚群起主要促进作用。

【关键词】：
【学位授予单位】：中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R459.7
【目录】：

目录4-6

缩略词表6-8

中文摘要8-10

英文摘要10-13

前言13-14

试验流程图14-15

实验一 APACHE Ⅱ评分与脓毒症患者预后关系研究15-21

1 实验目的15

2 实验对象15

3 实验方法15-16

4 实验结果16-19

4.1 脓毒症患者APACHE Ⅱ评分分析16-17

4.2 脓毒症患者APACHE Ⅱ评分与各临床指标相关性分析17-18

4.3 脓毒症患者APACHE Ⅱ评分与临床预后相关性分析18-19

5 讨论19-21

实验二 Th17细胞在脓毒症发病中的作用机制研究21-30

1 实验目的21

2 实验材料21-22

3 实验方法22-23

4 实验结果23-27

4.1 脓毒症患者与健康对照组Th1、Th17表达频率分析23-24

4.2 脓毒症各分组与健康对照组Th1、Th17表达频率分析24-26

4.3 脓毒症患者Th17表达频率与APACHE Ⅱ评分相关性分析26-27

5 讨论27-30

实验三 单核细胞在脓毒症发病中的作用机制研究30-43

1 实验目的30

2 实验材料30

3 实验方法30

4 实验结果30-41

4.1 脓毒症患者与健康对照组单核细胞计数分析30-31

4.2 脓毒症患者与健康对照组单核细胞亚群组成分析31-34

4.3 脓毒症患者与健康对照组单核细胞亚群HLA-DR MFI分析34-37

4.4 脓毒症患者与健康对照组单核细胞亚群CD14 MFI分析37-41

5 讨论41-43

实验四 单核细胞与淋巴细胞共培养实验43-47

1 实验目的43

2 实验材料43

3 实验方法43-44

4 实验结果44-45

5 讨论45-47

全文总结47-48

参考文献48-52

文献综述52-65

攻读学位期间发表文章情况65-66

致谢66

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【参考文献】

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