不同分化角质形成细胞对成纤维细胞的作用及其机理研究

发布时间：2018-06-03 18:09

  本文选题：角质形成细胞 + 分化　； 参考：《第四军医大学》2006年硕士论文

【摘要】：目的 分离培养人正常成纤维细胞及角质形成细胞，研究角质形成细胞分泌的活性物质对成纤维细胞的增殖、胶原分泌及细胞周期的影响；测定角质形成细胞分泌的活性物质，观测角质形成细胞分泌的TGF-β_1及IL-1α对成纤维细胞的增殖及Ⅲ型胶原分泌的作用；探讨分化前后角质形成细胞对成纤维细胞的增殖及胶原分泌的作用，测定其不同阶段活性因子的表达差异。通过实验，验证角质形成细胞分泌的活性物质，阐明在创伤愈合及异常瘢痕形成中角质形成细胞的作用，从分子水平论述其作用机制。方法 实验第一部分 取小儿包皮，以消化法培养正常角质形成细胞，组织块法培养成纤维细胞，收集角质形成细胞上清，配制成各种不同浓度，分别为12％，25％，50％(DMEM组为对照组)，作用于成纤维细胞，MTT法测定其增殖，羟脯胺酸比色法测定细胞外胶原分泌；50％浓度上清液及DMEM分别作用于成纤维细胞，流式细胞仪测定成纤维细胞周期的变化；实验第二部分 免疫组织化学方法测定角质形成细胞分泌的IL-1α，再将实验分成四组，50％浓度角质形成细胞上清液(CM)为对照组，其余三组为CM+0.04mg／l IL-1α抗体，CM+0.2mg／l IL-1α抗体，CM+1mg／l IL-1α抗体，分别加入成纤维细胞培养24h，以CCK—8试剂盒测定细胞增殖，放射免疫法测定胶原分泌。实验第三部分 与实验二同样方法及分组进行TGF-β_1对成纤维细胞作用的研究，但其中TGF-β_1抗体浓度分别为0.2mg／l，1mg／l，，2mg／l。实验第四部分 收集融合达90％及
[Abstract]:Objective to isolate and culture human normal fibroblasts and keratinocytes, to study the effects of the active substances secreted by keratinocytes on the proliferation, collagen secretion and cell cycle of fibroblasts, and to determine the active substances secreted by keratinocytes. To observe the effects of TGF- 尾 1 and IL-1 伪 secreted by keratinocytes on the proliferation of fibroblasts and the secretion of type 鈪

本文编号：1973710