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一种简化的分离与培养小鼠原代肝细胞的方法

发布时间:2018-07-17 07:50
【摘要】:目的建立一种简单的能获得高纯度小鼠原代肝细胞的分离与培养方法。方法将经典的两步灌流法简化为经下腔静脉逆向脉冲式灌注,利用低速离心法对肝细胞分离液进行纯化;利用锥虫蓝染色法鉴定细胞活率;培养瓶预先用鼠尾胶原铺备,利用倒置显微镜观察细胞形态。结果此法得到了足够数量的肝细胞,细胞活率大于90%;细胞可稳定贴壁1周。结论成功建立了一种简单的分离与培养小鼠原代肝细胞的方法。
[Abstract]:Objective to establish a simple method for isolation and culture of mouse primary hepatocytes with high purity. Methods the classical two-step perfusion method was simplified as reverse pulse perfusion through the inferior vena cava, the hepatocyte isolate was purified by low speed centrifugation, the cell viability was identified by trypanosomiasis blue staining, and the culture bottle was prepared with rat tail collagen. Cell morphology was observed by inverted microscope. Results A sufficient number of hepatocytes were obtained by this method, the cell viability was more than 90%, and the cells could adhere to the wall for 1 week. Conclusion A simple method for isolation and culture of mouse primary hepatocytes was successfully established.
【作者单位】: 青岛大学医学院附属青岛市市立医院消化内二科;中国海洋大学医药学院;青岛大学医学院微生物学教研室;青岛市消化疾病重点实验室;
【基金】:国家自然科学基金资助项目(81170337/H0304)
【分类号】:R329.2

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号:2129670

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