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TRAF2 K48聚泛素化位点的研究

发布时间:2018-07-28 14:11
【摘要】:目的筛选K48聚泛素链在肿瘤坏死因子受体相关因子2(tumor necrosis factor receptor-associated facto r 2,T RA F2)上的主要修饰位点。方法比较不同物种间的T RA F2氨基酸序列,选出人T RA F2上保守率在90%以上的赖氨酸。构建人野生型TRAF2的表达载体及保守赖氨酸突变为精氨酸的突变表达载体。将不同的TRAF2表达载体与NF-κB荧光素酶报告基因表达载体共转至293FT细胞中,通过荧光素酶检测NF-κB激活情况。结果人TRAF2上共有8个保守率在90%以上的赖氨酸,酶切及测序结果证明本研究成功构建TRAF2野生型和突变型表达载体。NF-κB荧光素酶报告基因检测证明TRAF2-K320可能是K48聚泛素链的主要修饰位点。结论 TRAF2-K320位点对TRAF2介导的NF-κB激活具有负向调控作用。
[Abstract]:Objective to screen the main modification sites of K48 polyubiquitin chain on tumor necrosis factor receptor related factor 2 (tumor necrosis factor receptor-associated facto r 2 T RA F 2. Methods the amino acid sequences of T RA F 2 in different species were compared, and lysine with a conservative rate of more than 90% on human T RA F 2 was selected. The expression vector of human wild-type TRAF2 and the mutant expression vector of conserved lysine to arginine were constructed. Different TRAF2 expression vectors and NF- 魏 B luciferase reporter gene expression vectors were co-transfected into 293FT cells, and the activation of NF- 魏 B was detected by luciferase. Results there were 8 lysines with a conservative rate of more than 90% in human TRAF2. Restriction endonuclease digestion and sequencing showed that TRAF2 wild-type and mutant expression vector. NF- 魏 B luciferase reporter gene was successfully constructed in this study. The results showed that TRAF2-K320 may be the main modification site of K48 polyubiquitin chain. Conclusion TRAF2-K320 site plays a negative role in the activation of NF- 魏 B mediated by TRAF2.
【作者单位】: 同济大学医学院免疫学教研室;
【基金】:国家自然科学基金(31170824)
【分类号】:R3416

【共引文献】

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10 张文;张p,

本文编号:2150467


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