Apelin促进人诱导性多能干细胞心肌定向分化的研究

发布时间：2018-11-06 07:24

【摘要】：目的探讨Apelin对人诱导性多能干细胞(hiPSC)的心肌定向分化作用。方法 hiPSC经悬浮法诱导形成拟胚体,分为Apelin处理组(Apelin组)和对照组。Apelin组在高糖DMEM培养液中加入10μmol/ml Apelin,分别于第3、7、11、15、21天采用RT-PCR、Western blot法检测及免疫荧光染色,观察干细胞全能性标记物Oct4、心肌祖细胞标记物Nkx 2.5、心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)的表达变化。结果 Apelin组iPSC在诱导分化后第3天Oct4和Nanog基因表达水平明显降低,分别为同期对照组的(63.2±10.1)%和(51.7±1.6)%(P0.01);诱导分化后第7天Nkx 2.5和cTnI基因表达水平明显升高,分别为同期对照组的(162.4±22.5)%和(250.6±22.3)%(P0.05,P0.01);诱导分化后第15天时,cTnI表达为同期对照组的(156.2±6.4)%(P0.05);免疫荧光染色显示,cTnI阳性细胞明显多于对照组。结论 Apelin可明显促进hiPSC的心肌定向分化。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of Apelin on myocardial directional differentiation of human inducible pluripotent stem cells (hiPSC). Methods hiPSC was induced to form embryoid body by suspension method and was divided into two groups: Apelin treated group (Apelin group) and control group. In Apelin group, 10 渭 mol/ml Apelin, was added to the high glucose DMEM culture medium on the 3rd day of 711111521 days, and was detected by RT-PCR,Western blot assay and immunofluorescence staining. The expression of cardiomyocyte progenitor cell marker Nkx 2.5 and myocardial specific troponin I (cTnI) (I (cTnI) were observed. Results the levels of Oct4 and Nanog gene expression in Apelin group were significantly lower than those in control group (63.2 卤10.1)% and (51.7 卤1.6)% respectively on the 3rd day after induction of differentiation (P0.01). On the 7th day after differentiation, the expression of Nkx 2.5 and cTnI increased significantly, which were (162.4 卤22.5)% and (250.6 卤22.3)%, respectively. On the 15th day after differentiation, the expression of cTnI was (156.2 卤6.4)% of that of the control group (P0.05), and immunofluorescence staining showed that cTnI positive cells were significantly higher than those in the control group. Conclusion Apelin can obviously promote the myocardial directional differentiation of hiPSC.
【作者单位】： 第四军医大学西京医院心内科;
【基金】：国家自然科学基金(30970845,81270168) 军队十二五重点项目(BWS12J037)
【分类号】：R329

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本文编号：2313545