基质金属蛋白酶9在大鼠跟腱异位骨化模型中的动态变化研究

发布时间：2019-01-24 11:35

【摘要】：目的通过观测创伤早期大鼠异位骨化模型中基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)表达变化,探讨MMP-9对预测异位骨化发生的价值。方法取4~5周龄雄性SD大鼠132只,体重(135.0±6.5)g,随机分为两组(n=66)。实验组通过钳夹并切断跟腱制备异位骨化模型,对照组仅暴露跟腱。术后观察两组大鼠一般情况,2、3、4、5、6、7、8 d两组各取8只大鼠,取跟腱组织行大体、组织学及免疫组织化学染色观察,取血清及跟腱组织分别行ELISA及RT-PCR检测MMP-9蛋白含量及基因表达。通过两组剩余10只大鼠术后5、10周X线片及术后10周组织学观察结果,诊断异位骨化形成情况。结果所有大鼠均存活至实验完成。各时间点对照组大鼠跟腱无明显变化,呈正常跟腱结构;实验组随时间延长,跟腱断端硬度逐渐增加,出现大量不规则结缔组织及软骨细胞,MMP-9免疫组织化学染色呈深染阳性。各时间点实验组MMP-9蛋白含量及基因相对表达量均显著高于对照组(P0.05);实验组MMP-9蛋白含量及基因相对表达量均总体呈上升趋势(P0.05)。根据X线片及组织学观察结果,术后10周实验组大鼠跟腱组织均发生异位骨化,对照组均无异位骨化发生。结论在大鼠跟腱异位骨化早期,MMP-9表达明显升高,提示其对预测异位骨化发生有参考意义。
[Abstract]:Objective to investigate the value of MMP-9 in predicting ectopic ossification by observing the changes of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) expression in rat model of ectopic ossification at the early stage of trauma. Methods 132 male SD rats (135.0 卤6.5g) were randomly divided into two groups (n = 66). The experimental group made ectopic ossification model by clamp and amputated Achilles tendon, while the control group only exposed Achilles tendon. The general condition of the two groups was observed after operation. Eight rats were taken from each group for 8 days after operation. The Achilles tendon tissues were observed by gross, histological and immunohistochemical staining. ELISA and RT-PCR were used to detect MMP-9 protein content and gene expression in serum and Achilles tendon respectively. The formation of ectopic ossification was diagnosed by X ray film and histologic observation at 5 and 10 weeks postoperatively in the remaining 10 rats in both groups. Results all rats survived until the experiment was completed. The Achilles tendon of the control group showed normal Achilles tendon structure. In the experimental group, the hardness of the Achilles tendon increased gradually with the extension of time, a large number of irregular connective tissues and chondrocytes appeared, and the MMP-9 immunohistochemical staining showed deep staining. The content of MMP-9 protein and the relative expression of gene in experimental group were significantly higher than those in control group at each time point (P0.05), while the content of MMP-9 protein and relative expression of gene in experimental group were all on the rise (P0.05). According to the results of X-ray film and histological observation, heterotopic ossification occurred in the Achilles tendon of the experimental group 10 weeks after operation, but no ectopic ossification occurred in the control group. Conclusion in the early stage of heterotopic ossification of Achilles tendon, the expression of MMP-9 was significantly increased, suggesting that it may be useful in predicting the occurrence of ectopic ossification.
【作者单位】： 南方医科大学第三临床医学院;南方医科大学附属奉贤医院骨科;
【基金】：上海市卫生局科研课题资助项目(20134204)~~
【分类号】：R-332;R641

【参考文献】

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本文编号：2414439