大鼠血栓闭塞性脉管炎模型的建立与丹参提取物防治作用初步观察

发布时间：2019-09-10 09:33

【摘要】： 目的 建立大鼠血栓闭塞性脉管炎(TAO)模型和模型坏疽程度评价指标;初步观察丹参提取物的防治作用。 方法 雄性Wistar大鼠50只,随机分为5组,每组10只,假手术组、2.0mg月桂酸(Lauric Acid, LA)组、1.5mgLA组、1.0mgLA组和0.5mgLA组,假手术组右侧股动脉注入0.1ml生理盐水,其它四组分别注入0.1ml不同浓度的LA溶液。注射后,观察大鼠肢体变化情况,主要观察患肢皮肤颜色、肿胀、坏疽和木乃伊化程度,持续两周。采用坏疽程度分级标准和坏疽指数(GI)记录造模后1天、4天、7天、14天的病变进展。造模后第15天,测定各组的全血粘度、血浆粘度、血沉、红细胞压积、红细胞相关指数、血浆纤维蛋白原等指标,分析血液流变学变化情况;常规H-E染色和三色染色(Masson法)观察大鼠肢体的病理变化和进行血栓计数;测量微血管密度值推断在缺血缺氧状态下机体形成侧枝血管的能力。进一步优化TAO模型。雄性Wistar大鼠24只,随机分为3组,0.8mgLA组(n=10)、0.6mgLA组(n=10)和0.4mgLA组(n=4)。右侧股动脉注射相应浓度的LA溶液0.1ml。观察指标同上。 观察丹参提取物的防治作用。雄性Wistar大鼠40只,随机分为5组,每组8只,假手术组、模型组、紫花丹参水提物组(SM-A)、白花丹参水提物组(SMA-A)、白花丹参醇提物组(SMA-E)。造模前12小时,SM-A组、SMA-A组和SMA-E组给予相应的提取物(20g/kg生药浓度)灌胃,假手术组、模型组给予等体积生理盐水灌胃。每天一次,共两周。坏疽程度的评价采用GI,记录术后1天、4天、7天、14天的GI,其余观察指标同上。 结果 1.LA剂量与模型损伤出现的时间以及损伤的严重程度有密切相关。2.0mg和1.5mgLA组的病变进展速度快,在造模后第4天,多数大鼠坏疽范围超过踝关节,第14天坏疽范围接近膝关节。1.0mg和0.8mgLA组病变进展较为缓慢,到第7天,仅部分大鼠坏疽范围超过踝关节,第14天坏疽范围在踝关节附近。0.5mg和0.6mgLA组多数大鼠坏疽仅局限于足掌前端。0.4mgLA组未出现肢体损伤。0.8mg、1.0mg、1.5mg和2.0mgLA组在造模后第7和14天的坏疽程度分级无统计学差异。0.8mgLA组的GI,在造模后第1、4、7天明显低于2.0mg、1.5mg和1.0mgLA组(P0.05)。 与假手术组相比,0.8mg、1.0mg、1.5mg和2.0mgLA组的低切变率下全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数、血浆纤维蛋白原、血栓形成数明显增高(P0.05)。而微血管密度(MVD)仅0.6mg和0.8mgLA组增高明显。 2.SMA-E组、SMA-A组和SM-A组第4天的GI明显减小,全血粘度、血浆粘度、红细胞变性指数和血浆纤维蛋白原的含量比模型组明显降低(P0.05)。SMA-E组的微血管密度高于假手术组和模型组(P0.05)。 结论 1.采用股动脉注射LA法制备大鼠TAO模型,方法简便,模型成功率可达100%。经分析比较和优选,确定了制备大鼠TAO模型的最佳LA用量为0.8mg～1.0mg。 2.提出了客观评价TAO模型的新指标-坏疽指数,建立了坏疽指数的定量测定标准和计算方法。 3.初步证明白花丹参醇提物、白花丹参水提物、紫花丹参水提物对大鼠TAO模型具有治疗作用,以白花丹参醇提物治疗作用较强。
【图文】：

注射LA（2.0mgLA组）5分钟后实验大鼠的肢体改变右侧肢体出现明显苍白，，与对侧相比，有明显的差异

有明显的差异附 图18A 18B图 18 注射 LA 后第一天大鼠肢体的缺血改变2.0mgLA 组出现明显的缺血表现，足趾部前端已发生坏疽（18A）；1.0mgLA 组缺血表现不如 2.0mgLA 组明显，足趾部未出现明显坏疽（18A）
【学位授予单位】：泰山医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R-332;R285

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 李亲长,张芬荣;丹参通脉汤内服、外洗治疗血栓闭塞性脉管炎52例[J];河北中医;2003年06期

2 朱惠斌,陈懿,葛金文;建立一种脑梗死血瘀证大鼠模型的实验研究[J];湖南中医药导报;2004年06期

3 周青,贺菊乔,曹晖,陈其华,周亮;脉管通胶囊对血栓闭塞性脉管炎大鼠模型影响的研究[J];湖南中医学院学报;2003年04期

4 沈成兴,梁春,陈良龙,钱菊英,王克强,陈灏珠,葛均波;经冠状动脉内注射月桂酸钠构建大鼠冠状动脉微栓塞模型[J];中国动脉硬化杂志;2005年04期

5 刘茅茅,李小玲,王拥军,梁德君,梁宪红;腔隙性脑梗死动物模型的建立[J];中华老年心脑血管病杂志;2003年05期

6 张小龙,马建国,徐明;改良大鼠微梗死模型[J];脑与神经疾病杂志;2003年03期

7 刘洪军;万建建;艾燕;;白花丹参中脂溶性成分提取工艺的优选及HPLC法含量测定[J];齐鲁药事;2006年07期

8 金星,张大伟,孟红,张勇,刘秀云;血栓闭塞性脉管炎动物模型的初步研究[J];山东中医药大学学报;2001年06期

9 陈锋,李占玲,吕延伟;脉痛宁胶囊治疗Ⅱ期血栓闭塞性脉管炎疼痛的实验研究[J];现代中西医结合杂志;2005年12期

10 李再胜,袁丽,高振玲;丹参和山莨菪碱治疗血栓闭塞性脉管炎46例临床分析[J];新医学;1999年12期

本文编号：2533946