人工进化丙型肝炎病毒（HCV）C和E1区噬菌体展示文库的构建及初步筛选

发布时间：2019-10-09 14:41

【摘要】：丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus，HCV)是引起慢性肝脏疾病的主要原因之一，并与肝硬化和肝癌的发生密切相关。全世界约有1.7亿HCV感染者，HCV的感染越来越引起人们的重视。HCV基因序列的高度变异性，主要表现为病毒各种基因型、亚型及准种变异的存在和免疫逃避现象，使病毒得以逃避宿主免疫系统的作用而造成病毒的持续感染，因而难以治疗及预防。HCV没有理想的细胞模型，除黑猩猩外也没有方便的动物模型，这使HCV致病机制及疫苗的研究遇到了极大的困难。 DNA改组(DNA shuffling)技术，通过基因在分子水平上的重组，改变基因原有核苷酸序列，创造新基因，并定向筛选具有预期性状的突变体，赋予表达产物以新的功能。它是一项全新的体外人工进化模式，是迄今为止所知道的最有效的分子进化技术。 噬菌体展示技术(phage display technique，PDT)是利用丝状噬菌体外壳蛋白来展示外源多肽的新技术。它使随机肽库和编码他们的DNA序列联系起来，通过和特异性的靶分子(抗体、酶、细胞表面受体等)进行结
【图文】：

肤和勃膜传播是最主要的传播方式在某些HCV传播占60%~90%，反复使用污染的注470万人感染HCV。抗一HCV阳性母亲将HCV为2%，若母亲在分娩时HCVRNA阳性，则7%。也有部分HCV感染者的传播途径不明[3l口的形态特征认为，HCV呈球形，表面有刺突，可能是一病毒科样RNA病毒16101乞khaashi等171在电镜二十面体颗粒，可被抗核心抗体识别。Kaiot与极低密度脂蛋白受体砰LDL)偶联的病毒面有钉突，裸病毒颗粒的直径为30一4Onnr。据直径约55unl，内有含病毒核酸的30一35mn核，表面有7nnl长的钉突状结构(图1)。

些地区有lb、2a和3b型报道;6型主要见于香港和澳门地区，在南方边省份也可见此基因型[’.0川.HCv感染宿主后，经过一定时期，在感染体内形成以一个优势株为主的相关突变株病毒群，称为准种(quasisPeeies)。4HCv基因组的结构和功能HCV基因组由位于5’端和3’端的两个非编码区(Unrtnaslatedregion，U仪加on一nartslaetdregion，NTR)和一个开放读码框(openreadingrfmae，ORF)组成。核糖体通过进入HCVS’一TR的内在核糖体进入位点(iniemalribosomalenyrtsiet，IREs)将HCV基因组翻译成一个前体聚蛋白，后者被宿主和病毒蛋白酶共同切割成为10个有独立功能的HCv蛋白【’2】。根据功能的不同，，将10种HCV蛋白分为结构蛋白和非结构蛋白两大类(图2)。它们不但在HCV的生活史中发挥着重要的作用，而且也影响着宿主细胞的信号传导、凋亡及物质代谢等一系列生化过程〔’31。
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R373

【参考文献】

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本文编号：2546831