登革病毒2型诱导血管内皮细胞凝血与纤溶相关分子表达的研究

发布时间：2019-10-12 07:59

【摘要】：登革病毒2型诱导血管内皮细胞凝血与纤溶相关分子表达的研究 研究背景和目的:登革出血热/登革休克综合征(Dengue haemorrhagic fever/Dengue shock syndrome,DHF/DSS)主要临床表现包括出血、血管通透性升高与低血容量性休克等,提示其发病机制可能涉及止血缺陷。血管内皮细胞(vein endothelial cells,VECs)在调节血管渗透性和维持血液生理状态等方面起重要作用,(Dengue virus,DV)登革病毒能够感染人VECs,但DV对VECs的促凝和抗凝活性是否存在影响尚不清楚。 VECs能够合成分泌组织因子(tissue factor,TF)、组织因子抑制物(tissue factor inhibitor,TFPI)、血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)、组织纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,tPA)和组织纤溶酶原激活物抑制物1(tisslle plasrninogen activator inhibitor type-1,PAI-1)等多种重要分子,参与凝血级联反应和纤溶系统平衡。VECs有序合成这些分子对维持血流生理状态起关键作用。在本研究中,应用DV_2感染人脐静脉血管内皮细胞(human umbilica vein endothelial cells,HUVECs),观察DV_2对HUVECs表达组织因子(TF)、组织因子抑制物(TFPI)和血栓调节蛋白(TM)以及组织纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)的影响,以探索血管内皮细胞在DHF/DSS的出血和血浆外渗等重要的病理生理过程所起的作用。 方法:应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用生长良好的第二、三代细胞进行试验。同时应用(cell counting Kit-8)CCK-8进行DV_2感染前后的细胞活性测定;发色底物法测定DV_2组和对照组培养上清液中tPA,PAI-1活性;反转录聚合酶链反应(reverse transcript—polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测细胞内TF、TFPI、TM、tPA和PAI-1 mRNA水平。
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R373

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本文编号：2547962