人骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导分化成血管内皮细胞能力的研究
发布时间:2019-11-27 03:36
【摘要】:【目的】探讨人骨髓间充质干细胞(MSCs)在体外特定的条件下分化成血管内皮细胞的可能性,并比较ATRA(全反式维甲酸)、IGF—1(类胰岛素生长因子)在诱导MSCs体外成内皮细胞过程中的作用。 【方法】经密度梯度离心和贴壁培养相结合的方法从人骨髓中分离提纯间充质干细胞(MSCs),分别加入两种诱导培养基Ⅰ(M199培养基+10%胎牛血清+100U/ml青霉素+100μg/ml链霉素+VEGF10ng/ml+bFGF5ng/ml+IGF-1 2ng/ml)、A(M199培养基+10%胎牛血清+100U/ml青霉素+100μg/ml链霉素+VEGF10ng/ml+bFGF5ng/ml+ATRA 1μmol/L)中作为实验组I、A;以未添加细胞因子的MSCs作为阴性对照组M;以内皮细胞作为阳性对照组E。分别在光学显微镜下、倒置显微镜下、电镜下观察4组细胞形态和细胞计数;并对4组细胞行Ⅷ因子免疫组化染色、流式细胞术测细胞表面CD34、KDR的表达、RT—PCR法检测培养细胞KDR的表达、Western法检测培养细胞vWF的表达。
【图文】:
倒置显微镜下各组培养细胞形态(x100)
A组细胞开始增殖速度较I组慢,从第4天开始A组细胞增殖速度加快,到第7天末,,工组与A组所获细胞数分别为4.85Xl少/m1、5.10X10‘/ml(见图2、表z)。表1。各组培养细胞计数(x士,sn=3)Table1.N皿bersofeultureeellsindifferentgroups(x士s,n=3)细胞数(xl04)ldZd3d4dsd6d7d2.92士0.744.13士0346.52士0名97.84士0名17.51士0.697.34士0.837.37士0夕l分组一M组11.38士0.161.97士0573.05士0.713.87士0.734.90士0534.81士0.774.85士0名41.09士0.811.55士0532.18士0石23.01士0.404.54士0.414.72士0石85.10士0.68组A组
【学位授予单位】:四川大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R329.2
本文编号:2566436
【图文】:
倒置显微镜下各组培养细胞形态(x100)
A组细胞开始增殖速度较I组慢,从第4天开始A组细胞增殖速度加快,到第7天末,,工组与A组所获细胞数分别为4.85Xl少/m1、5.10X10‘/ml(见图2、表z)。表1。各组培养细胞计数(x士,sn=3)Table1.N皿bersofeultureeellsindifferentgroups(x士s,n=3)细胞数(xl04)ldZd3d4dsd6d7d2.92士0.744.13士0346.52士0名97.84士0名17.51士0.697.34士0.837.37士0夕l分组一M组11.38士0.161.97士0573.05士0.713.87士0.734.90士0534.81士0.774.85士0名41.09士0.811.55士0532.18士0石23.01士0.404.54士0.414.72士0石85.10士0.68组A组
【学位授予单位】:四川大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R329.2
【参考文献】
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本文编号:2566436
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