我国发现仅携带slt2vha大肠杆菌O157：H7菌株

发布时间：2020-04-03 05:34

【摘要】： 大肠杆菌O157：H7感染已经成为全球关注的问题。我国1987年首次从腹泻病患者粪便标本分离到大肠杆菌O157：H7，1999年在某些地区发生了大肠杆菌O157：H7引起的暴发，2000年疫区有扩大的趋势。我国O157：H7大肠杆菌的情况已经发生了重大变化。 为了探索我国大肠杆菌O157：H7感染的流行病学特点，我们使用了聚合酶链反应、生化反应、抗生素敏感实验、脉冲电场凝胶电泳等分子生物学方法，对我国1999-2000年徐州地区分离到的部分大肠杆菌O157：H7进行了分析。研究发现，1999年在江苏省徐州市从腹泻病患者、HUS患者分离的5株产生志贺毒素的大肠杆菌0157：H7菌株，属于一个PFGE型。2000年在江苏省徐州市铜山县腹泻病患者的粪便标本分离的10株产生志贺毒素的菌株以及从蜣螂肠道分离到的4株产生志贺毒素的大肠杆菌O157：H7，属于另两个PFGE型，和1986、1987、1988年在徐州市腹泻病患者的粪便标本分离的菌株PFGE图谱不同。提示1999年的疫情由不同的病原菌引起。 另外使用针对志贺毒素2及其变种的引物对进行PCR检测、细菌染色体PstⅠ和PCR产物的HaeⅢ、RasⅠ酶切分析，以及PCR产物的序列分析，发现2000年从江苏省徐州市患者和家畜家禽粪便标本分离的大肠杆菌O157：H7菌株仅仅携带slt2vha基因。其致病性质粒的限制性酶切 山西医科大学 硕士学位论文 图谱也发生了改变。鉴于江苏省徐州市1999年的分离菌株携带s川和sa。 基因，，可以认为该地的优势菌型发生了改变，其流行病学意义有待于进 一步证实。
【图文】：

Rsal有两个酶切位点，Ncl’l没有酶切位点;在使用SLTZe一SLTZf引物对合成的PCR产物上，刀改elll有一个酶切位点，乃夕ull有一个酶切位点(见图3)。PCR产物的限制性酶切片段和DNA序列分析(见附表)的结果提示2000年分离菌株均含有SLTZ一C(SLTZ一vh一a)基因，没有其它是SLTZ毒素。表3:使用PCR合成的孔T2及其变种的基因片段的酶切片段的预期大小’引物对」限制性内切酶slt2、lt2。1、lt2、。:ltzv。。SLTZ一e!产人Zelll285·161、124{161、124SLTZ一d}Rasl216、69136、80(69)*}216、69…Ncil285285’59、’26…-孔刀。}枷exll3482一6、13212一6、132…pvull323、25323、25250、73、25SLTzf!·

四:致病性质粒的限制性内切酶分析将1999年和2000年的分离菌株进行质粒DNA提取，Pstl酶切，在1%的琼脂糖凝胶电泳，发现有明显的区别(图4)图4:大肠杆菌0157:H7菌株的质粒DNA的Pstl酶切分析。从左向右:泳道1为分子量标准，泳道2一3分别为大肠杆菌2000年0157:H7菌株，第4为1999年0157:H7菌株。图4一1:1999年与2000年菌株的溶血素基因的Pstl的southem一blot结果
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R378

【引证文献】

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1 帅领;重庆市家畜大肠杆菌O157致病性及外膜蛋白的初步研究[D];西南大学;2008年

本文编号：2612996