大鼠孤束核微注射5羟色胺系统药物对睡眠-觉醒的影响及机制研究

发布时间：2020-05-10 22:23

【摘要】：目的：睡眠-觉醒是一种生物学的昼夜节律。孤束核是内脏传入神经核团，同时作为低位脑干的睡眠诱发区，与许多内脏疾病的睡眠问题有关，但是其产生的机制尚未完全理清。5-羟色胺是作用于睡眠-觉醒的重要单胺类神经递质。故本实验采用脑立体定位法在孤束核进行微注射5-羟色胺系统的药物，研究5-羟色胺在孤束核影响睡眠-觉醒时的作用通路，同时推测孤束核在睡眠中发挥的作用，为进一步的理解睡眠机制、治疗内脏疾病引起的睡眠问题提供理论依掘，为药物研发提供靶点。方法：1、实验动物：本实验选用体重为220～260g的健康成年雄性SD大鼠。2、动物手术：将大鼠固定于脑立体定位仪上，参照大鼠脑立体定位图谱，定位孤束核的位置，埋置导药管；同时在皮层放置2个电极记录脑电，颈下2个电极记录肌电。动物恢复5天，然后进行记录。 3、脑电记录：采用日本光电脑电机对动物进行每天4h，连续4天的脑电图记录。 4、病理切片：记录完毕，动物采用心脏灌注取脑，做石蜡切片进行HE染色完成组织定位鉴定；并对NS、5-HTP、MS三组动物做冰冻切片，进行免疫组化染色。 5、统计方法：采用SPSS10.0统计软件分析，每组动物进行自身配对t检验。α=0.05，双侧t检验结果：1、各组自身配对检验：对照组(NS组)无统计学意义；5-HTP组、8-OH-DPAT组、H89组差别有统计学意义，均使觉醒减少，慢波睡眠增加，异相睡眠增加；MS组无显著的统计学意义，但是有明显的觉醒增加、睡眠减少的趋势；spiperone组、cAMP组差别有统计学意义，觉醒增加，慢波睡眠减少，异相睡眠减少。 2、NS组、5-HTP组、MS组进行的孤束核5-HT_(IA)R染色示：与NS组相比，5-HTP组的5-HT_(IA)R上调，MS组的5-HT_(IA)R下调。闷成创卜花开究生学位论文 3、NS组、5一HTP组、MS组进行的孤束核5一轻色胺能神经纤维染色示:与 NS组相比，5一HTP组的5一轻色胺能神经纤维终末染色加强，MS组的5一轻色胺神经纤维终末染色减弱。 4、NS组在中脑进行5一HTIAR的染色:5一HTIAR在中脑的分布广泛，尤其在中缝核、网状结构LDT用PT处。 5、NS组、5一HTP组、MS组进行的中脑5一HT神经纤维染色示:与NS组相比，5一HTP组的5一HT能阳性细胞少，MS组的5一HT能阳性细胞多。结论:1、孤束核作为睡眠诱发区，5一轻色胺在慢波睡眠和异相睡眠时相发挥着重要的作用。 2、5一HT在孤束核影响睡眠一觉醒时是通过作用5一HT，AR，，祸联G订。蛋白，使 cAMP生成减少，PKA磷酸化减少而发挥觉醒减少、睡眠增加的生物学效应。 3、在孤束核处，5一轻色胺增多延长慢波睡眠:而在中脑处则是5一轻色胺减少引起慢波睡眠延长:这说明了在孤束核和中脑之间存在相互抑制的网络调节系统。 4、作为异相睡眠发生的授时因子，孤束核通过低位脑千的上行抑制系统影响上行激动系统，产生异相睡眠。 5、5一轻色胺在睡眠一觉醒中的作用主要通过突触后靶组织发挥。从异相睡眠看，胞外5一轻色胺含量与中缝背核的抑制是一致的，可能是通过脑桥被盖背外侧核/脑桥被盖网状核(LDT爪PT)的胆碱能细胞功能的去抑制而引起异相睡眠。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R338

【参考文献】