细胞中microRNA的分析及细胞形态研究
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【摘要】:细胞不仅是机体的基本组成单位,更是机体进行一切生命活动的基本单元。因此,近年来人们围绕细胞开展了一系列的科学研究。本论文以细胞研究为主题,开展了利用连接核酸扩增技术对单细胞中microRNA进行检测的工作;通过呼吸图案法制备了具有稳定微井结构的聚苯乙烯薄膜对细胞形态进行分析;利用电纺丝技术获得无细胞毒性的不可逆聚环氧乙烷湿度检测器进行环境湿度监控。下面对研究内容进行逐一介绍:一、单细胞中microRP NA分析目前人们开展的关于细胞中的核酸研究大多针对细胞平均水平进行,从而忽略了单细胞个体之间的差异性。然而这类信息在疾病的早期诊断和预防治疗中都非常重要。同时,单细胞也是组织进行新陈代谢的基本单位,针对单细胞开展研究不仅可以为人们研究新型药物靶点提供信息,还可以为致病机理的阐明提供新的思路。因此,本论文通过对目前开展的关于单细胞中核酸分析方法进行改进,提出了连接核酸扩增的方法来实现对单细胞中microRNA进行检测。这种连接核酸扩增的方法具有很高的灵敏度,而且操作简单快速,因此,它可以作为单细胞中核酸分析的有效途径。二、细胞形态研究细胞体外培养的微环境会影响细胞形态。当细胞所处的生长环境发生变化时,细胞会通过调节自身状态来适应这种变化。随着近年来人们开展的关于细胞及其生长环境关系的研究,人们发现细胞形态分析在细胞分析中具有重要意义。因此,关于细胞形态分析的研究逐渐发展起来。目前开展的对于细胞形态分析的主要方法是采用不同表面结构的材料作为细胞生长基质,从而模拟环境变化对细胞产生的影响,进而开展对细胞形态的分析研究。本论文通过呼吸图案法制备了聚苯乙烯微井薄膜,将这种具有不同表面特性的微井薄膜作为细胞新陈代谢的物质基础,从而为细胞形态分析的相关研究提供更可靠的基础材料。三、环境湿度检测细胞培养技术在工业化时代得到了广泛的应用。我们可以发现在医学、药学、生物学以及农学等领域都需要细胞培养技术。因此,细胞培养技术成为现代生产工业中的重要技术。而在细胞培养过程中应该以细胞体内生长环境为依据为细胞体外培养提供更接近其原来生长状况的培养条件,这样才能进一步培养出接近其原来生长状态的细胞。关于细胞培养技术,对细胞生长环境湿度的控制尤为重要。因此,本论文采用水溶性的聚环氧乙烷为原料,通过静电纺丝技术制备静电纺丝薄膜,以这种薄膜作为湿度检测器来实现对环境湿度的检测。
【关键词】:单细胞 microRNA 呼吸图法 电纺丝 湿度检测
【学位授予单位】:陕西师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:O652;R329.2
【目录】:
- 摘要3-5
- Abstract5-9
- 第1章 绪论9-31
- 1.1 MicroRNA简介9-18
- 1.1.1 Northern印迹技术检测miRNA10-11
- 1.1.2 DNA芯片技术检测miRNA11-14
- 1.1.3 均相溶液中检测miRNA14-18
- 1.2 单细胞中miRNA分析18-20
- 1.2.1 毛细管电泳技术18-19
- 1.2.2 微流控芯片技术19-20
- 1.3 细胞形态研究20-24
- 1.3.1 光刻蚀法21
- 1.3.2 软刻蚀法21-22
- 1.3.3 扫描电子束刻蚀技术22
- 1.3.4 呼吸图案法22-24
- 1.4 环境湿度检测24-28
- 1.4.1 细胞培养技术简介24-25
- 1.4.2 细胞培养技术应用25-26
- 1.4.3 静电纺丝技术26-28
- 1.5 选题目的及意义28-31
- 第2章 研究报告31-53
- 2.1 单细胞中microRNA分析31-42
- 2.1.1 引言31-32
- 2.1.2 实验部分32-36
- 2.1.3 结果与讨论36-41
- 2.1.4 本章小结41-42
- 2.2 细胞形态研究42-46
- 2.2.1 引言42
- 2.2.2 实验部分42-43
- 2.2.3 结果与讨论43-46
- 2.2.4 小结46
- 2.3 环境湿度检测46-53
- 2.3.1 引言46
- 2.3.2 实验部分46-48
- 2.3.3 结果与讨论48-51
- 2.3.4 小结51-53
- 结论53-55
- 参考文献55-65
- 致谢65-67
- 攻读学位期间研究成果67
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