热应激预适应后HSP70的表达及其对大鼠肢体缺血再灌注损伤的影响

发布时间：2020-05-21 17:27

【摘要】： 【目的】(1)探讨大鼠肢体在缺血再灌注损伤过程中热休克蛋白70(HSP70)表达情况。(2)探讨热应激预适应对肢体缺血再灌注损伤的影响及其作用机制。(3)为肢体缺血再灌注损伤的临床治疗开辟新的思路。 【方法】(1)分别建立大鼠肢体缺血再灌注损伤模型和大鼠热应激预适应模型；(2)实验动物为体重200～220gSD大白鼠72只，实验动物随机分为三组：①正常对照(Normal Control，NC)组；②缺血再灌注(Ischemia Reperfusion，IR)组；③热应激预处理后缺血再灌注(Heat Stimulated Pretreatment+Ischemia Reperfusion，HP+IR)组。三组分为四个时间点：缺血前1h、缺血再灌注1h、再灌注4h、再灌注12h。(3)应用生理多导仪记录大鼠肛温、心率等生命体征的变化；应用光还原(NBT)法测定SOD活性，硫代巴比妥酸法(TBA)测定MDA的含量；应用全自动生化分析仪测定血清中谷草转氨酶(GOT)，乳酸脱氢酶(LDH)两种酶的含量；(4)应用Western blot法测定大鼠肢体腓肠肌内HSP70的含量；(5)应用光学显微镜观察大鼠腓肠肌组织学变化。 【结果】(1)IR组大鼠肛温测定与对照(NC)组相比缺血前1h和再灌注后12h没有显著性差异(P ＞0.05)，再灌注1h和再灌注4h与对照组有显著性差异(P＜0.05)；HP+IR组大鼠肛温于缺血前1h、再灌注后1h、再灌注后4h、再灌注后12h与对照组和IR组有显著性差异(P＜0.05)；(2)NC组、IR组和HP+IR组于缺血前1h血清中ALT、L-LDH的含量无显著性差异；IR组和HP+IR组于再灌注1h、4h、12h各时间段血清ALT、L-LDH含量明显高于 正常对照组（P＜ 0．of），并有随再灌注注时间延长不断升高的趋 势；HP＋IR组于再灌注lh、4h、12h血清ALT、L－LDH含量明 显低于m组（P＜0．01）。（3）IR组缺血前 lh与正常对照组血浆中 MDA的含量无显著性差异，再灌注后lh、4h、12h组的mA含量 明显高于正常对照组（P＜0．01），并有随再灌注时间延长不断升高 的趋势；HP＋IR组缺血前lh的MDA含量与IR组和正常对照组相 比，没有显著性差异（P＞0．05），再灌注 lh、4h、12h组的 MDA 含量明显高于正常对照组（P＜0．01），低于m组（P＜0．01），并有 随再灌注时间延长不断升高的趋势。（4）IR组缺血前lh与正常对 照组血浆中SOD的活性无显著性差异，再灌注lh、4h、12h组 的SOD活性明显低于正常对照组（P＜0．of），并有随再灌注时间延 长不断降低的趋势：HP＋IR组缺血前lh的SOD活性与IP组和正常 对照组相比没有显著性差异叩＞0．05h 再灌注注lh、4h、Eh后 的SOD活性明显低于正常对照组（P＜0．of），高于m组（P＜0．of）， 并有随再灌注时间延长不断降低的趋势。（5）正常对照组仅有少 量的HSP70表达，缺血再灌注注后骨骼肌中HSP70表达量增加，， 并随时间延长有减少的趋势；热应激预适应后HSP70的表达明显 增加，且在缺血前lh的表达量最多，并随时间延长有减少的趋势。 （6）光镜观察（X 400）：HP＋IR组与 IR组相比较，肌细胞明暗带 较清晰，小血管内膜较完整，肌细胞肿胀减轻。 【结 论】（1）大鼠热应激预适应可以影响其生命体征的变 化：大鼠的肛温在热应激预适应后开始升高，随着时间的延长有 所下降，但仍高于正常水平；大鼠的心率在热应激预适应后开始 加快，并维持于一个较高的水平；（2）大鼠热应激预适应可使肢 体缺血再灌注注后血清中的ALT、L－LDH含量有所降低，提示可一 定程度减轻骨骼肌细胞损伤；（3）大鼠热应激预适应可使肢体缺 血再灌注后血清中 MDA含量降低和 SOD活性升高，可以降低肢体 缺血再灌注损伤的程度；④HSP70在正常大鼠肢体内有基础表 达：HSP70在大鼠热应激预适应后有大量的表达八5） 大鼠热应激 预适应后可以诱导HSP70的大量表达，而且HSP70的表达也有一 一卜 个过程，一般在缺血前lh有大量的HSP70表达，随着时间的延长， HSP70的表达也随着减少，但在各个时间段热应激预适应后HSP70 的表达量多于单纯肢体缺血再灌注后HSP70的表达量；仰 大鼠 肢体缺血再灌注后血清中的队T、L－LDH增加，测定队T、L－LDH 含量可作为观察肌细胞损伤的敏感指标：（7） 测定肢体缺血后mA 含量和 SOD活性可以反映肢体缺血再灌注损伤的程度。
【图文】：

缺血再灌注1h,IR组部分骨骼肌明暗带模糊(辣根染色，40X)

缺血再灌注12h,IR组大部分骨骼肌明暗带模糊，甚至消失(辣根染色，40X)
【学位授予单位】：第一军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R363

【参考文献】

相关期刊论文 前3条

1 郑磊,颜晓慧;热应激时热休克蛋白70及其细胞保护作用[J];国外医学.卫生学分册;1999年04期

2 陈建常,傅源,卢开柏,王乐农;丹参对止血带致肢体肌损伤保护作用的研究[J];中华创伤杂志;1994年05期

3 罗海吉，孙峻松，邱仞之, 万为人，郭进强;高温对小鼠脂质过氧化作用的影响[J];中华劳动卫生职业病杂志;1995年02期

本文编号：2674647