hSef在不同人组织和细胞系中的表达分布

发布时间：2020-06-02 17:48

【摘要】：纤维细胞生长因子(FGF)信号通路在机体发育,成体组织的血管生成和创伤修复及肿瘤发生等过程中发挥着重要的作用。FGF通过结合细胞表面的FGF受体,使其二聚化并自体磷酸化,活化后的FGF受体具有酪氨酸激酶活性,进而活化胞内下游多条信号通路。其中较为重要的是 Ras-MAPK激酶通路。 活化的FGFR通过Grb2激活Ras,然后Raf,MEK,ERK自上而下依次活化,最后活化的ERK转位入核,调控下游基因的表达。 过量或者不适当的FGF信号会导致某些癌症的发生以及发育过程的紊乱。因此,在正常生理条件下,FGF信号的强度和持续时间必须受到严格的调控。Sef(Similar expression to fgf genes)是一个新发现的调节FGF信号通路的抑制因子,它最初是从斑马鱼胚胎文库中分离出来,与FGF8等基因在斑马鱼胚胎相同的区域表达,并且对FGF信号通路起抑制作用。鼠源Sef(mSef)基因也相继被克隆出来,过量表达的mSef抑制FGF诱导的3T3细胞的增殖,同时伴有FGF受体磷酸化水平的降低。随后人源Sef(hSef)基因被克隆出来,并发现其对FGF诱导的PC12细胞的分化起抑制作用。但对hSef在各种组织及细胞系中的表达分析还没有详尽报道。 本文将人源Sef蛋白胞内区编码序列与GST融合构建原核表达质粒进行重组蛋白的表达与纯化并制备多抗。在Cos-7细胞中转染表达hSef显示其分子量分别为80KD,100KD,比体外翻译的分子量偏大,暗示有糖基化存在。Northern印迹的结果表明,hSef主要表达在人肾和睾丸组织。免疫组化的结果显示,hSef在人肾和睾丸及相应癌组织表达水平较高。RT-PCR检测到Sef在众多细胞系有广泛的表达。
【图文】：

FR-HLGAG 复合体的简化模型。引自 Venkatat al. (1999) 的激活和信号的启动 FGF 后，形成二聚体，并磷酸化自身和些残基能够募集含有 Src 同源物 2（SH2 100 个氨基酸残基，SH2 结构域特异性的 3-6 个氨基酸残基[7]，含有 SH2 结构域的白。这些蛋白在和 FGFR 结合后构象发生而适配蛋白则募集其他具有酶活力的靶蛋链传递下去，最终导致细胞的响应。 为例，胞内区共有 7 个酪氨酸残基：Tyr46，其中 Tyr653、654 在 FGFR1 的激酶结

要的信号系统，这条通路中的蛋白，尤其是 Raf 和多种蛋白有相互作用因此受到广泛的调节。还有其他一些蛋白被 FGFR 活化，这里就不一一赘述了，FGF 信号路的活化最终导致了细胞的增殖，，迁移和分化等多种效应。下面是 FGF信号通路的示意图。
【学位授予单位】：清华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R33

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本文编号：2693540