铅和乙醇联合作用对小鼠精子质量的影响及硒拮抗作用的研究

发布时间：2020-06-03 03:11

【摘要】： 目的：铅在工业生产中应用极广泛，是常见的生产性毒物和环境污染物，酒精是常用的有机溶剂及酒类饮料中的主要成分之一。铅和乙醇均可对生殖系统产生毒性作用而影响精子质量。近来调查发现铅作业男工多有嗜酒行为，饮酒者发生铅中毒的比例较高。但有关二者对生殖系统联合作用的研究较少。另外，硒作为谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）的主要成分与精子质量关系密切。精子质量作为反映雄性生殖能力的主要指标，以其简便易行可靠而广泛应用于临床和科研。其中精子总数、精子活动率及精子畸形分别从不同侧面反映了男性的生育力；LDH-x同工酶作为精子能量代谢中的一个关键酶，与精子活力及生育力有关，LDH-x对男性不育的诊断和发生原因的研究有重要意义。为此，本研究对铅和乙醇联合作用对小鼠精子质量的影响进行了研究，，并进一步研究了微量元素硒的拮抗作用，为进一步揭示铅和乙醇的生殖毒作用机理，为男性不育的预防和治疗提供科学依据。方法：取昆明种雄性健康性成熟小鼠84只，体重为25~30g，按体重随机分为14组，每组6只，具体分组如下，单独染毒组：低铅组(LL)、高铅组(HL)、低醇组(LE)、高醇组(HE)；联合染毒组：低铅+低醇组、低铅+ WP=4 高醇组、高铅+低醇组、高铅+高醇组；硒干预组：硒+低铅+低醇组、硒+低铅+高醇组、硒+高铅+低醇组、硒+高铅+高醇。另设阴性和阳性对组。醋酸铅染毒剂量分别为15、30mg/kg体重，乙醇染毒剂量分别为1000、2000mg/kg体重，亚硒酸钠剂量为1mg/kg体重(于灌胃前1小时腹腔注射)。每天灌胃染毒1次，连续染毒5天，间歇两天，连续3周。阴性对照组给与等量的双蒸水，阳性对照以40mg/KgＢW的环磷酰胺腹腔注射，连续5天。所有动物于首次染毒后第35天断颈处死，取一侧附睾制备精子悬液，另一侧附睾和睾丸取下立即称重，记录睾丸、附睾重量并计算睾丸、附睾的脏器系数。将孵育15分钟的精子悬液置于显微镜下进行精子总数、活动精子数的检查，并推片做伊红染色和LDH-x组织化学染色，观察精子畸形率并根据酶显色强度来划分其分值，计算每只小鼠的LDH-x酶活性积分值。对实验数据用SPSS11.0进行统计分析。结果: 1.小鼠经铅和乙醇处理后，高剂量组的一般状况不同程度的受到影响，表现精神萎靡和轻微腹泻，硒拮抗组与对照组均活动良好。2.各铅、乙醇单独染毒组的睾丸重量及脏器系数与对照组相比均无显著性差异（P0.05），但高醇和高铅+高醇组的附睾重量及脏器系数均显著低于对照组，说明大剂量铅和乙醇对小鼠的附睾及脏器系数的影响大于铅或乙醇的单独作用，但不存在协同作用。硒拮抗组睾丸、附睾重量及脏器系数与阴性对照组相比均无显著性差异（P0.05）。3.铅、乙醇各单独染毒组与阴性对照相比小鼠精子数量、精子活力 WP=5 及LDH-x均明显降低，精子畸形率除低醇组外均显著增高。而且高剂量组与低剂量组有显著差异（P0.05）。说明随着铅和乙醇染毒剂量的增加，小鼠的精子质量表现为下降趋势。4.铅和乙醇联合染毒组对小鼠精子质量的损害加重，表现为小鼠精子计数、精子活力及LDH-x酶活性强度均显著降低，精子畸形率增高，和阴性对照组相比具有显著差异（P0.01）。而且铅和乙醇联合染毒组的精子计数、精子活力及LDH-x酶活性强度均显著低于各单独染毒组（P0.05）。但未观察到铅和乙醇对上述指标的交互作用，说明铅和乙醇对上述指标的影响可能不存在协同作用。5.硒拮抗组精子质量的各项观察指标与对照组均无显著性差异（P0.05）；硒拮抗组精子计数、精子活力及精子LDH-x酶活性强度均显著高于联合染毒组（P0.01），并且有交互作用；亚硒酸钠也可减轻铅或/和乙醇所致的精子畸形率的升高，但未发现交互作用的存在。结论：1.铅和乙醇对小鼠的精子质量有损害作用，并随着剂量的增加损害作用而表现出增强的趋势。2.铅和乙醇同时作用时，对小鼠精子质量的损害加重，但在本研究剂量范围内未观察到协同作用的存在。3.硒可以拮抗铅和乙醇对雄性生殖系统的损伤，补充硒有助于改善精子质量。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：R363

【参考文献】