乙肝结合蛋白转基因小鼠的研制

发布时间：2020-06-17 21:44

【摘要】：乙型肝炎病毒(HBV)只能感染人类和少数灵长类动物，这使得对它的研究 受到很大制约。基于目前对HBV细胞受体的认识，有研究通过细胞转染，使 HBV非易感细胞表达HBV binding protein或human Annexin V，用HBV体外感 染后可检测到这些非易感细胞中的HBV DNA显著地增多。而转基因动物技术的 出现，提供了一种改变动物的遗传信息，使其获得新的表型的方法。本研究将上 述细胞水平的研究进展应用于制备表达HBV binding protein和human Annexin V 的转基因小鼠，尝试建立乙肝易感的小鼠模型。 用PCR的方法从小鼠基因组中扩增出白蛋白的启动子和增强子序列。利用 RT-PCR，以HepG2细胞的RNA为模板扩增出HBV binding protein和human Annexin V cDNA，将二者用IRES(internal ribosomal entry site)相连，置于小鼠白蛋 白增强子启动子的调控之下。通过显微注射的方法制备转基因小鼠，经Southern Blot检测得到5只founder小鼠。经RT-PCR和流式细胞术的检测，HBV binding-protein和human Annexin V获得了肝脏特异性的表达。用乙肝患者的血清 对转基因阳性小鼠进行腹腔和静脉注射，但目前经PCR和ELISA检测，尚未有 感染的证据。
【学位授予单位】：中国人民解放军军事医学科学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R346

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本文编号：2718206