蛋黄抗体的基础与应用研究

发布时间：2020-06-19 01:30

【摘要】： IgY是一个低级的血清免疫球蛋白，能转运至蛋黄，使后代获得 被动免疫保护。在功能上类似IgG。由于IgY具备与哺乳动物IgG不 同的理化性质和生物学活性，因此IgY广泛应用于免疫检测制剂和免 疫治疗制剂。 目前在蛋白质功能上仍未有证据证明免疫球蛋白进化中高度保守 区的存在。为了证实免疫球蛋白在进化中存在高度保守的同源区域， 本实验用鼠抗鸡IgY单克隆抗体和多克隆抗体，去识别不同种系动物 的免疫球蛋白与IgY共有的抗原决定簇。在研究中采用dot-ELISA法 检测出抗鸡IgY抗血清与鸟类免疫球蛋白样品（鸽、鹤鹑、鸭、鹅） 发生阳性交叉反应，并通过间接ELISA试验验证了dot-ELISA的阳 性检测结果。从制备的13株抗鸡IgY单克隆抗体中未能筛出识别三 个种系以上的免疫球蛋白样品的McAb，提示常规免疫及细胞融合方 法很难筛到识别IgY同源决定簇的McAb。进而采用鸡IgY分别与各 种免疫球蛋白（虾、鱼、鳖、鸽、鸭、兔、马、人）作基础、强化免 疫，Balb/c小鼠所产生的抗血清分别与上述各强化免疫样品作ELISA 检测，结果显示我们设计的交替免疫方案能增加IgY同源决定簇的丰 度，增强识别IgY同源决定簇的抗体分泌，所产生的多克隆抗体能同 时与多种系免疫球蛋白样品发生交叉反应，并初步显示IgY同源决定 簇可能存在于被测的各种系免疫球蛋白中，且至少鸡IgY与各禽类蛋 黄抗体存在共同的抗原决定簇。 在蛋黄抗体应用研究上，运用杂交瘤制备技术，筛选到两株鼠抗鸡 IgY单克隆抗体，分别命名为DFF和DFA。经单克隆抗体相加试验 和Western-Blot试验证实，它们分别识别IgY重链上的不同位点。其 中高亲合力的DFF标记HRP，在国内率先建立了间接ELISA法检测 特异性蛋黄抗体的技术平台。在抗传染性腹泻的多价鸡蛋黄抗体的研 究中，采用自立的蛋黄抗体ELISA法检测技术，确立了霍乱弧菌致 病性大肠杆菌基因工程疫苗免疫鸡，产生高滴度抗体的免疫规程， 特异的IgY抗体显示识别、结合霍乱毒素的能力，为进人临床应用创 立必要的技术条件。
【学位授予单位】：第一军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2000
【分类号】：R392.11

【引证文献】

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1 肖飞;抗犬瘟热和犬细小病毒病二联卵黄抗体的制备及其临床治疗效果观察[D];南京农业大学;2010年

本文编号：2720115