ZEB2基因3′UTR区转染对人胃黏膜上皮细胞GES-1增殖、侵袭、迁移的影响

发布时间：2020-06-29 16:51

【摘要】：目的探讨E盒结合锌指蛋白(ZEB)2基因3′非翻译区(3′UTR)转染人胃黏膜上皮细胞GES-1后对其增殖、侵袭、迁移的影响。方法将人工合成的ZEB2 3′UTR质粒及miR-200b micmics采用脂质体Lipofectamine2000转染GES-1细胞。分别设对照组、突变组和ZEB2 3′UTR组,qRT-PCR检测转染后miR-200a/b/c及ZEB1/ZEB2mRNA的表达。再设对照组、ZEB2 3′UTR组、ZEB2 3′UTR+无义序列组和ZEB2 3′UTR+miR-200b micmics组。West-ern blot检测转染后ZEB1/ZEB2、基质金属蛋白酶(MMP)-2/9、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达;Transwell侵袭实验和划痕实验检测细胞侵袭迁移能力;MTT法检测细胞增殖活性。结果与对照组及突变组相比,转染ZEB2 3′UTR组miR-200a/b/c的表达均下调,以miR-200b最为明显,ZEB1/ZEB2 mRNA及蛋白水平表达上调,其细胞迁移、侵袭、增殖活性均增强(P0.05)。ZEB2 3′UTR+miR-200b micmics组较ZEB2 3′UTR组迁移、侵袭、增殖活性降低。结论ZEB2 3′UTR可能通过调控miR-200a/b/c的表达进而影响其对靶基因的转录后调控,增加细胞的侵袭、迁移能力,导致GES-1细胞的恶性转化倾向。

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