我国不同地区福氏志贺菌耐药性及基因分型研究

发布时间：2017-03-30 14:06

  本文关键词：我国不同地区福氏志贺菌耐药性及基因分型研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：通过对2002年至2013年从华北、东北、华东、中南、西北五个地区五个省市收集的1219株福氏志贺菌株进行药物敏感性检测、耐药基因的扩增、耐药基因的分型测序以及PFGE基因分型,了解我国不同地区福氏志贺菌的耐药情况与流行趋势。方法：使用微量肉汤稀释法测定了1219株福氏志贺菌对21种药物的敏感性,用PCR的方法扩增相关耐药基因,使用lasergene软件与MAGA6.0软件进行序列的的比对与分析,利用脉冲场凝胶电泳技术进行宋内志贺菌的基因分型,最后采用BioNumerics分析软件对所有菌株进行聚类,分析其相似度。结果：实验菌株对于四环素、氨苄西林、甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲VA唑、氯霉素、替卡西林5种抗生素普遍耐药,对亚胺培南、阿米卡星、头孢吡肟、呋喃妥因、头孢他啶5种抗生素敏感度较高。共检测了包括blaTEM, blaCTX以及整合子在内的21种不同的耐药基因。沈阳地区实验菌株可分为22个不同的PFGE带型,分型后表现出较高的基因同源性。结论：目前各地区流行的福氏志贺菌株对甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲嗯唑与四环素已经普遍耐药,某些地区出现相同聚类分型的优势菌株表明该地区存在流行的福氏志贺菌群。因此,加强对不同地区福氏志贺菌的监控对减少多重耐药菌株的产生具有重要意义。
【关键词】：福氏志贺菌 耐药性 脉冲场凝胶电泳 基因分型
【学位授予单位】：山西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R378.25;R440
【目录】：

• 摘要7-8
• 前言8-12
• 1 志贺菌的流行特性研究进展8-9
• 2 我国福氏志贺菌的流行特性研究进展9
• 3 细菌耐药机制的研究进展9-12
• 实验一 福氏志贺菌血清学鉴定12-24
• 1 材料12
• 1.1 菌株12
• 1.2 相关试剂12
• 1.3 仪器设备12
• 2 方法12-14
• 2.1 培养基的制备13
• 2.2 细菌的分离和培养13-14
• 2.3 福氏志贺菌株的血清学鉴定14
• 3 结果14-22
• 3.1 北京地区福氏志贺菌血清学鉴定结果15-16
• 3.2 上海地区福氏志贺菌血清学鉴定结果16-17
• 3.3 沈阳地区福氏志贺菌血清学鉴定结果17-18
• 3.4 新疆地区福氏志贺菌血清学鉴定结果18-20
• 3.5 广西地区福氏志贺菌血清学鉴定结果20-21
• 3.6 全国福氏志贺菌血清学鉴定结果总结21-22
• 4 讨论22-24
• 实验二 福氏志贺菌株耐药性分析24-39
• 1 材料24
• 1.1 相关试剂24
• 1.2 仪器设备24
• 2 方法24-25
• 2.1 准备工作24
• 2.2 菌株的接种24-25
• 2.3 孵育25
• 2.4 读取测试结果25
• 3 结果25-37
• 3.1 北京地区福氏志贺菌抗生素敏感性试验结果26-28
• 3.2 上海地区福氏志贺菌抗生素敏感性试验结果28-29
• 3.3 沈阳地区福氏志贺菌抗生素敏感性试验结果29-30
• 3.4 新疆地区福氏志贺菌抗生素敏感性试验结果30-31
• 3.5 广西地区福氏志贺菌抗生素敏感性试验结果31-33
• 3.6 全国福氏志贺菌抗生素敏感性试验结果33-37
• 4 讨论37-39
• 实验三 耐药福氏志贺菌株相关耐药基因的检测39-63
• 1 材料39
• 1.1 菌株39
• 1.2 相关试剂39
• 2 方法39-44
• 2.1 试剂39
• 2.2 煮沸法提取模板DNA39-40
• 2.3 引物40-42
• 2.4 耐药基因的扩增42-44
• 2.5 电泳与测序44
• 3 结果44-60
• 3.1 部分耐药基因凝胶电泳结果图44-51
• 3.2 不同地区菌株耐药基因扩增结果比较51-60
• 4 讨论60-63
• 实验四 沈阳地区福氏志贺菌株分子分型研究63-72
• 1 材料63-64
• 1.1 菌株63
• 1.2 相关试剂63
• 1.3 仪器63-64
• 2 方法64-68
• 2.1 试剂64
• 2.2 PFGE标准方法64-67
• 2.3 图像分析和结果聚类分析67-68
• 3 结果68-70
• 4 讨论70-72
• 结论72-73
• 参考文献73-77
• ABSTRACT77-79
• 攻读学位期间发表论文79-81
• 致谢81

【参考文献】

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