临床分离耐喹诺酮阴沟肠杆菌gyrA基因和parC基因突变的检测

发布时间：2020-07-30 21:53

【摘要】： 氟喹诺酮类抗生素是广谱抗菌素，由于其对革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌的良好抗菌活性被临床广泛应用，但近年来临床分离常见致病菌对喹诺酮类抗菌素耐药率迅速上升。作为条件致病菌的阴沟肠杆菌已成为院内感染的常见致病菌之一，可引起呼吸道、泌尿道及伤口等部位的感染，其耐喹诺酮菌株亦呈不断增多趋势，使临床应用受到限制。本研究收集从本市四家医院2000年6月—2001年6月临床分离的59株阴沟肠杆菌，通过药敏试验测定筛选出30株耐喹诺酮菌株(萘啶酸MIC≥32μg／ml)，结合聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及聚合酶链反应—单链构象多态性(PCR-SSCP)分析技术，检测耐药菌gyrA基因及parC基因突变情况，并分析基因突变与喹诺酮耐药表型的关系。gyrA基因PCR-RFLP检测结果显示，30株临床分离耐喹诺酮菌株的gyrA全部(100％)存在Ser-83位点突变；PCR-SSCP分析显示除Ser-83位点突变以外还存在其它类型的位点突变。gyrA基因突变株中29株(96.7％)对萘啶酸呈现高水平耐药(MIC≥1024μg／ml)，25株(83.3％)对萘啶酸、环丙沙星(MIC≥4μg／ml)及氧氟沙星(MIC≥8μg／ml)交叉耐药。30株耐喹诺酮阴沟肠杆菌parC基因的PCR—SSCP分析结果显示，12株(环丙沙星MIC 8μg／ml～16μg／ml)存在parC基因点突变，占40％，18株无parC突变。本研究结果表明，gyrA基因突变是对喹诺酮类药物耐药的主要原因，parC基因突变可能在对氟喹诺酮类抗菌药物高水平耐药的形成中起了补充性作用。此外，临床分离菌对喹诺酮类药物耐药可能还存在膜通透性降低和／或主动泵出等多种机制。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R346

【参考文献】