霉酚酸酯对小鼠异基因骨髓移植中急性移植物抗宿主病的预防作用及机理研究

发布时间：2020-08-14 16:25

【摘要】： 同种异体骨髓移植（Allo-BMT）技术在近二三十年得到飞速发展，为一系列造血系统或非造血系统疾病的患者提供了新的希望。Allo-BMT的最大局限在于供受者之间HLA不合程度增高，移植物抗宿主病（GVHD）的风险增大，受者移植后的无病存活率受到影响。其中急性移植物抗宿主病（aGVHD）是移植早期死亡的主要原因，而慢性移植物抗宿主病（cGVHD）则降低了受者的生存质量和长期生存率。组织配型技术的提高以及多种免疫抑制剂的联合应用，使Allo-BMT后GVHD的发生率明显降低。环孢菌素A（CSA）联合短程氨甲喋呤（MTX）作为aGVHD的标准预防方案，在临床上推广应用，大大降低了aGVHD的发生率和严重程度。即便如此，在HLA主要位点完全相合的Allo-BMT，aGVHD的发生率可达30％-60％，由其直接或间接引起的死亡占BMT后死亡率的50％左右。因此，预防和治疗aGVHD 成为提高同种异体骨髓移植（Allo-BMT）成功率的关键。霉酚酸酯（MMF）是霉酚酯酸（MPA）的酯类前体，MPA选择性抑制次黄嘌呤核苷酸脱氢酶（IMPDH）。该酶是鸟嘌呤核苷酸经典合成途径中的限速酶。IMPDH 受抑导致鸟嘌呤核苷酸生成减少，进而DNA、RNA合成受阻。MPA对鸟嘌呤核苷酸合成的另一途径，即补救合成途径没有影响。中性粒细胞可同时通过补救途径，合成鸟嘌呤核苷酸，而T、B淋巴细胞则更依赖于经典途径合成，故MPA对淋巴细胞的嘌呤合成具有选择性抑制作用。MMF在人类实体脏器移植抗排斥方面有独特的功效，1995年美国FDA批准MMF应用于临床肾移植抗排异治疗，证明MMF 较传统硫唑嘌呤治疗有明显的优越性。MMF用于预防和治疗异基因骨髓移植中急性 GVHD，在国际是仅见数篇报道。本单位黄河等从1998年开始在非亲缘异基因骨髓移植在应用MMF联合CSA、MTX预防aGThD，取得良好效果。但MMF 在aGVHD动物模型中的作用及机理研究至今罕见报道。本研究目的在于建立小鼠异基因骨髓移植－急性移植物抗宿主病动物模型，观察霉酚酸酯（MMF）以及不同的联合用药方案（MMF＋CSA＋MTX，CSA＋MTX）对aGVHD的预防作用，并进一步探讨MMF预防aGVHD的可能作用机制，为临床应用提供实验依据。第一部分：霉酚酸酯（MMF）对小鼠异基因骨髓移植中急性移植物抗宿主炳＊cvnn）的预防作用目的：探讨新型免疫抑制剂一霉酚酸酯（MMF）对小鼠异基因骨髓移植（allo－BMT）中急性移植物抗宿主病（aGVHD）的预防作用。方法：建立主要组织相容性抗原（MHC）完全不合的两个纯种近交系小鼠悦鼠：C57BL／6）（H／X雌性；受鼠： BALB／C（HPX雄性］异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病bllo书MT伯）动物模型。根据 aGVHD的发生强度分：小鼠中度 aGVHD模型（A型，移植小鼠的平均生存时间为刀天）：小鼠重度＊GVH D模型旧型，移植小鼠的平均生存时间为 6天）。分组：AI组（6只），MMF（30mg／kg／d）；AZ组（6 ．q），CSA＋MTX； A3组（6只），MMF（30mg／kg／d）联合 CSA＋MTX；A4组（6只），对照组，移植后未用 aGVHD预防方案山组（9只），MMF（30mg／kg／d）旧组（9 ．q），CSA＋MTX； m组（9只），＊＊F（3om叭咖）联合mA十＊TX；M组（9只），＊＊F（朋m咖叩）联合 CSA＋MTX；BS组（9 ．q），MMF（10ng／kg／d）联合 CSA＋MTX；B6对照组（9只），移植后未用 aGWID预防方案。以小鼠 aGVHD症状，移植小鼠中位生存时间（MST）、生存率（＋35天）、外周血象的恢复情况，以及GVHD病理分级作为钾价指标。结果：在小鼠中度aGVHD移植模型中，移植小鼠于2周后，逐渐出现消瘦、反应迟钝、脱毛、腹泻、耳廓充血增厚、双眼分泌物增多（结膜炎）等aGVHD 症状，不用aGVllD预防方案的移植小鼠（A4组），则aGVHD持续发展，死亡率达 100％，MST为ZI天。AI－A3组小鼠经单用或联用MMF、CSA、MTX等免疫抑制剂后，在不同程度上减轻甚至防止了aGVHD的发生，在移植后＋35天，小鼠的生存率分别为50％、50％、33％从3组的生存率较川人组低，但差异无显著性（P＞oj）5）。 3 在小鼠重度aGVHD移植模型中，移植小鼠于＋3－＋5天即出现少食少动、消瘦、腹泻、弓背体位、毛发紊乱无光泽等aGVHD症状，不用aGVHD预防方案的移植小鼠旧6组）死广高峰在＋5／7天，死亡率达 100％。应用，删P预防方案的 BIE 组小鼠aGVHD程度明显减轻，表现为消瘦、腹泻、腹胀、脱毛、耳廓增厚充血。双眼分泌物增多（结膜炎）等aGVHD症状，MST较B6组显著延长（分别延长3．4 天，丑4无，9刀天，6．1天，吕．瑟天，P＜0．05）。m－扔组的＊盯较＊组显著延长（P＜O．oj）； B3E 组的MST较BZ组稍延长，但无显著性差异；B3、BS组的MST较B4组延长，差异有显著性（P＜0．05）；m组与m组的＊盯无显著性差异。外周血象变化：发生重度 aGVHD的移植小鼠旧6组），MST仅为 6天，故观察不到其血象回升过程。中度和重度aGVHD应用预防案组的移植小鼠（AI．A3，BI．5组），＋5天左右白细胞开始?
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2001
【分类号】：R457.7;R392.4

【引证文献】