bFGF对骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的作用及机制

发布时间：2020-08-20 17:56

【摘要】：目的 对于神经系统疾病所致的神经功能障碍理想的治疗方法就是神经细胞移植,现代研究发现认为骨髓间充质干细胞(Marrow stromal stem cells, MSCs)是神经细胞移植理想的供体来源。为了探讨碱性成纤维生长因子（Basic fibroblast growth factor ,bFGF）对MSCs分化为神经元样细胞的作用及其机制，本课题利用bFGF与不同生长因子和化学诱导剂组合诱导MSCs向神经元转化，以期了解bFGF在MSCs转分化中的作用机制，为MSCs用于神经细胞移植提供重要基础。 方法 选择以下不同条件，诱导MSCs向神经元转化：第1组：不预诱导，接种细胞一天后加2%二甲基亚砜( Dimethyl sulfoxide ,DMSO)+200umol/L三羟基四甲基茴香醚 (Butylated hydroxyanisole ,BHA)和不含血清的DMEM/F12；第2组：10ng/mlbFGF预诱导一天,再加2%DMSO+200umol/LBHA和不含血清的DMEM/F12；第3 WP=6 组：0.5umol/L全反式维甲酸(All trans-retinoic acid, ATRA)+10ng/mlbFGF预处理一天，再用加2%DMSO +200umol/L BHA和不含血清的DMEM/F12；第4组: 10ng/mlbFGF预处理一天，再加不含血清的改良的神经细胞培养基（Modified neuronal medium, MNM）处理；观察分化过程中细胞形态、数目的变化，免疫细胞化学检测分化后细胞神经元烯醇化酶（Neuron specific enolase, NSE）、微管相关蛋白2（Microtubule associated protein2, MAP2）、胶质纤维酸性蛋白（Glial fibrillary acid protein, GFAP）以及N-甲基(酰)-D-门冬氨酸受体（NMDAR）和五羟色胺受体1D（ 5-Hydroxy tryptamine1D,）的表达情况，并计算转化率；观察FGFR的表达及诱导后不同时间点原癌基因c-myc蛋白的表达情况。 结果 1. 经各组条件诱导后，MSCs均能分化为具有典型神 经元形态的细胞，并明显表达NSE、MAP2、NMDAR和5-HT1D，但不表达GFAP；2.各组诱导转化率相比较，第2和3组即经bFGF，ATRA＋bFGF预诱导组明显高于不预诱导的第1组，第四组的转化率最高，达95%以上；3.诱导后的神经元样细胞FGFR-3表达明显增强，FGFR-1无明显改变；4.诱导后的神经元样细胞4小时开始表达c-myc蛋白，持续表达至36小时。 WP=7 结论 以DMSO和BHA为基础诱导剂，bFGF预处理可明显提 高MSCs向神经元样细胞的转化率达30%之多；首次发现浓度为10ng/ml的bFGF主要是通过FGFR-3作用于MSCs，基本上不通过FGFR-1；首次发现在MSCs向神经元样细胞分化中的过程中，c-myc可能发挥着促进MSCs转分化与凋亡双重作用
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：R329

【共引文献】

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本文编号：2798268