孕激素及间质细胞培养液对原代培养内膜腺上皮HOXA11基因表达的影响

发布时间：2020-09-02 13:30

　　同源框基因(homeobox gene)在脊椎动物胚胎发育中,具有控制体节特征和确定胚胎前后分化关系等作用。同源框基因是一类控制胚胎发育和细胞分化的调节基因,其表达的蛋白质为同源域蛋白,是一类转录调节因子。这类基因中都存在一个由183个碱基对(bp)组成的、高度保守的同源框(homeobox)序列。HOX基因是同源框基因中的一大类,它们表达的蛋白产物,参与调节胚胎发育和细胞分化。HOXA11基因是HOX基因家族中的一员,主要参与子宫形态的发生和发育的调控。近年来研究发现,同源框基因HOXA11在人子宫内膜的发育及孕卵着床过程中起着重要作用,而且在人子宫内膜中的表达呈周期性变化。卵巢性激素与HOXA11基因表达的关系是近年来HOX基因在生殖领域中的研究热点。目前认为HOX基因是性激素对子宫调节链中的重要介导基因,雌、孕激素对内膜的多种调节作用主要通过HOX基因介导完成;HOX基因的异常表达与多种妇科疾病(不孕、流产、内膜异位及肿瘤等)相关。因此,阐明HOX基因在子宫内膜中的表达规律,以及卵巢激素对其表达的调控机制具有非常重要意义。已有的研究表明:在体内,孕激素对内膜腺上皮HOXA11基因的表达起负调控作用;而体外研究发现,当上皮细胞与间质细胞分离培养时,孕激素并不能使上皮细胞HOXA11基因表达量下降,而是使其表达量增加。孕激素的作用效应大多通过孕酮受体(Progesteron receptor, PR)介导产生;RU486 WP=5 是一种孕酮拮抗剂,其与PR有较强的亲和力,通过竞争性地与PR结合而阻止孕酮的生物效应。本研究目的是通过体外培养实验,用半定量RT—PCR方法,研究孕激素对内膜腺上皮HOXA11基因表达的影响,尤其是内膜间质细胞在其中所起的作用,进一步探讨孕激素对内膜腺上皮HOXA11基因表达负调控作用的机制。结果显示:当内膜腺上皮细胞中含有30㳠经孕激素处理的间质细胞培养液时,加入孕激素或孕雌激素后第4小时,其HOXA11 基因表达量有下降趋势;第24小时,腺上皮细胞HOXA11 基因表达量下降明显;而用RU486预处理后再加入孕激素或雌孕激素,腺上皮细胞HOXA11基因表达量与对照组无差异;当上皮细胞中含有30㳠经RU486预处理后,再加入孕激素处理的间质细胞培养液时,孕激素或孕雌激素对内膜腺上皮HOXA11表达的负调控作用在第4小时消失;第24小时,转为正调控(HOXA11 基因表达量增加)。该组上皮细胞用RU486预处理后,再加入孕激素或孕雌激素时,腺上皮细胞HOXA11基因表达量与对照组相比无差异。上述结果提示,孕激素对内膜腺上皮HOXA11基因的负调控作用需要间质细胞参与,而且是间质细胞和内膜腺上皮中的PR共同介导完成这一负调控作用。目前已知,HOX基因的异常表达与多种妇科疾病(不孕、流产、内膜异位及肿瘤等)相关。本实验的这些结果为全面揭示卵巢激素对HOXA11基因的调节作用奠定研究基础,为从基因水平调节人类生育以及诊治人类生殖性疾病提供依据。
【学位单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2004
【中图分类】：R346
【部分图文】：

间2P组、间2PE组、间2RuP组和间2RMP2P2ERUP2RUP2ECP2CP3

孕激素,激素处理,对照组,间质细胞

图 7、间 1P 组和间 1PE 组在激素处理培养至第量与对照组相比明显减少，孕激素组（P1）减组 HOXA11 表达量与对照组相比无明显变化。0.00.51.01.52.02.51 2 3 标OXA1／内HGAPDH比值图 8、间质细胞孕激素培养液的上皮基因

激素处理,孕激素

图 11、间 2P 组和间 2PE 组加入激素处理培养至的表达量明显增加，以间 2P 组更为明显，而孕组和间 2RuPE 组， HOXA11 表达量与对照组相2.27002.27202.27402.27602.27802.28002.28201 2 3 标OXA1／内HGAPDH比值图 12、间质细胞 RU486 孕激素培养液的上皮

【参考文献】