白念珠菌酵母相和菌丝相ERG11基因的比较研究

发布时间：2020-09-24 16:26

　　 目的： 验证已知的白念珠菌菌丝相细胞的理想培养条件；通过对氟康唑敏感程度不同的白念珠菌酵母相和菌丝相细胞氟康唑作用靶酶基因ERG11序列的比较研究，以探讨两种细胞形态在基因序列上的差异性，从而为白念珠菌的病原真菌学研究其实验对象的选择(菌丝相或酵母相细胞)提供理论依据。 方法： 以同一母体来源的16株对氟康唑敏感程度不同的白念珠菌作为研究对象(分别为CA-1，CA-2，…，CA-17，无CA-10)，采用RPMI1640培养基(含10％的小牛血清)，37℃，连续传代培养7天，共转种12次，记录不同观察时间菌丝相和酵母相细胞数，计算菌丝相细胞形成率。分别提取酵母相和菌丝相细胞的基因组DNA。设计7对引物，分段扩增白念珠菌酵母相和菌丝相细胞的ERG11基因。扩增产物单链变性后，进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PCR-SSCP)，观察结果并选择两种细胞形态间具有差异的片段行DNA序列测定。 结果： 1．以RPMI1640(pH=7.5，含10％小牛血清)为培养基，37℃传代培养7天(转种12次)后，每株白念珠菌的菌丝相细胞形成率均达99％以上； 2．ERG11的分段扩增结果显示每株白念珠菌均能扩增出目的片段，不存在敏感菌株和耐药菌株的差异； 3．SSCP分析及DNA序列测定结果显示白念珠菌的酵母相和菌丝相细胞ERG11基因序列存在多位点的差异。 结论： 1．RPMI1640(pH=7.5，含10％小牛血清)，37℃传代培养7天(转种12次)是获得白念珠菌菌丝相细胞的理想条件； 2．白念珠菌的酵母相和菌丝相细胞间部分基因序列存在差异； 3．白念珠菌的菌丝相细胞是进行其病原真菌学研究的适宜研究对象。
【学位单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2003
【中图分类】：R379
【部分图文】：

第133一423bp，第403一7olbp，第678一975bp，第948一1254bp，第1229一1525bp和第1495一lso4bp，一长度分别为23lbp、29lbp、299bp、298bp、307bp、297bp和310bp)的结果显示所有菌株其ER‘jj基因的分段扩增结果均为阳性。图5、

人学2000级倾卜论文自念珠菌酵母相和菌丝相ERGll纂活.的比较研火图6分别为引物对Bl一BZ对白念珠菌CA一l，CA一2，…，CA一8和白念珠菌CA一9，CA一11，…，CA一17ERGjj的扩增结果;图7、(图8贝l]分别为引物对Gl一GZ对自念珠菌CA一l，CA一2，…，CA一8和白念珠菌CA一9，CA一11

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本文编号：2825966