丙型肝炎病毒不同区段特异性IgG亚类、抗体亲和力测定及其意义的初步研究

发布时间：2020-10-11 01:36

　　 背景：丙型肝炎主要的临床特征是感染慢性化，随着感染病程的延长，可以表现为病毒携带状态、慢性肝炎、肝硬化、甚至肝细胞癌。目前对丙型肝炎病毒(HCV)感染的慢性化以及发病机理还不完全清楚。机体特异性细胞免疫在清除细胞内感染的HCV中具有重要作用，与HCV感染的自限性具有一定的关系，同时也造成组织损伤；而机体特异性体液免疫，如抗-HCVHVR1抗体在HCV感染的自限性过程中也具有一定的作用，但对其它区段的特异性抗体在HCV感染慢性化以及发病机制中的作用还不清楚。 目的：以不同的HCV重组蛋白为包被抗原，检测患者相应的特异性IgG亚类及其特性，分析在不同HCV基因型以及不同临床结果的HCV慢性感染者中IgG亚类组成以及IgG亚类抗体亲和力，并初步探讨其意义。 材料与方法 1、病例选择：所有标本都经抗-HAV、抗-HEV及乙型肝炎病毒血清学检测排除甲型肝炎、戊型肝炎和乙型肝炎病毒感染，并经抗-HCV、HCVRNA检测，证实为HCV感染。以60例HCV慢性感染者(病程大于一年，抗-HCV阳性、HCV-RNA阳性)作为研究对象。在60份慢性感染者的血清中，有20例为IFN-α治疗前血清。 1、HCV基因分型：按Simmonds基因分型法将HCV分为六型。本研究中有50例HCV感染者病毒为1b型，其余10例为非1b型。 3、C、NS3、NS4、NS5区特异性IgG1、IgG2、IgG3、IgG4亚类测定：以各区段重组蛋白抗原包被，ELISA法在37℃下检测各特异性IgG1、IgG2、IgG4的吸光度A值，分别在4℃、37℃下检测各特异性IgG3的吸光度A值。 4、特异性ISG亚类抗体亲和力指数测定：选取各区段IgG亚类阳性的血清，进行抗体亲和力测定。在加入酶标抗体前在微反应孔中加入 南京医科大学硕士学位论文 SM M溶液处理，并比较在肪处理腑……A值。抗体的亲 和力指＃k＝尿素处理后 A．；。值／尿素处理前 4；。值 XI 0删。 5、总 lgG亚类的 0定：分另以 0．4 119鼠趴 IgGI、lgGZ、IgG3、 IgM单克隆狮狐巩 加法伽习mV特异性工G亚类的吸光度A 值。 结果 1、温颜各区腆异性IgG3的椰d有较大的影响，在4℃下聊u值 明显高子37℃下检测值。 2、在nV慢性感染者体内料mV特异性培GI、IgG3白蜘0值均 明显高于 IgGZ、IgG4。 3、C、贴3、屹4、贴5区特异性IgG3亲和力指赃10．2个17．4肢 间，而特异性IgGI、IgGZ、lgG4 Jii44白亲和力指鞭高，均明显大于30％。 多元线性回归分析表明IgG3型…别是抗—NS31gG3与ALT g较高 白才关性。 4、在fo型与非fo型mV。慢性感染者中各区附异性培G亚类的 组成无明显区别，而掩NS51gGI 的伽OM 干溅治疗有胞中明显高 于无效组。 5、在mV。慢性感染者中总lgG亚类伽I值较正常健康者总lgG亚 类检测值高。IgG亚类缺锄棘慢性 HCV感染者中罕见。 结论 1、C、NS3、NS4、NSS区特异性IgG3是仲低亲和力狐，而特异性 。IgGI、IgGZ、IgG4Jlfu44白亲和性较高。这种亲和力的差异对赃的伽IJ 有一定的影响。 2、在＊V慢性感染者体内各种mV蛋白特异性的IgG亚类组成以 IgGI、IgG3为3，锨示在慢胜mV感染者中几细B咖类型以ThZ为主， 并可能与＊V感染的慢性化存在一定的关系。 3、IgG3型抗体特u胁S31gG3与肝细J咙伤姊一定的相关性。 而抗—SSIgGI可能锨测a－干扰素疗效的一个指标。 4、在什型与非fo型肛V感染者中各区脓异。以gG亚类无区别。 5、IgG亚类原发性缺乏不是＊V感染慢性化主要原因。
【学位单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2002
【中图分类】：R392
【部分图文】：

CIgG3NS3IgG3NS4IgG3NSSIgG3图1不同温度下各特异性IgG3检测值的比较*与同区段37oCIgG3检测值比较P<0.05二、补体抑制该划全付工gG3检测的影响:从图2看出:在慢胜HCV染组中，EDTA处理前后各区段特异性工gG3吸光度值没有明显变化，明苹淋激活对工gG3检测无影响。口EDTA处理前口EDTA处理后粤V侧架娜0匕--月二七二.二‘二.‘--上--J.二二..曰‘.‘--上--J目二二二.一C1gG3NS3IgG3NS4IgG3NSSIgG3图ZEDTA处理前后不同区段特异性工gG3的比较

南京医科大学硕士学位论文三、慢性HCv感染组中各区段特异性工gG亚类组成:从图3可以看出各区段特异性IgGZ、工gG4抗体检测值均较了氏低于各对应抗体阳性临界值，各区段特异性1gGI、1gG3摧劝则值均较高。说明在HCv慢性感染者中特异性IgG亚类的组成以IgGI、IgG3为主。抗-CIgGI(0.48士0.42)和抗一NS3IgGI(0.62士0.42)明显高于抗-NS4IgGI(0.19士0.37)和抗一NSSIgGI(0.04士0.06)，抗-NS3IgG3(0.68士0.62)也高于抗-NS4IgG3(0.37士0.3)和抗，NSSIgG3(0.19士0.15)，表明NS3抗原和C抗原具有较好的抗原性。鑫拳口IgGI口IgGZ口IgG3DIgG4J以‘勺乙，土一又U户人U月竹勺‘nU粤V侧架哪NS3NS4NSS图3不同区段特异性IgG亚类的比较四、各区段特异性工gG亚类抗体亲和力测定:在慢性感染组中选择各特异性工gG亚类阳性的血清进行抗体亲和力指数测定。图4一7说明各区段特异性工gG亚类在尿素处理前后抗体检测值的变化情况，从图中可以看出各区段特异性工gGI、工gGZ、工gG4在尿素处理前后抗体推绷弓值变化不明显，它们的抗体亲和力指数分别平均在80.94哈90.32%、82.72%一93.73%和80.23%一85.43%之间

图3不同区段特异性IgG亚类的比较四、各区段特异性工gG亚类抗体亲和力测定:在慢性感染组中选择各特异性工gG亚类阳性的血清进行抗体亲和力指数测定。图4一7说明各区段特异性工gG亚类在尿素处理前后抗体检测值的变化情况，从图中可以看出各区段特异性工gGI、工gGZ、工gG4在尿素处理前后抗体推绷弓值变化不明显，它们的抗体亲和力指数分别平均在80.94哈90.32%、82.72%一93.73%和80.23%一85.43%之间，而各区段特异性工gG3检测值在尿素处理后检测值明显减低，统计学御全有显著性差异(P<0.05)，表明工9G3亲和力较了氏，抗体亲和力指数平均在10.2%一17.4%之间。工gGI、IgGZ、IgG4抗体的亲和力较IgG3为高。
【参考文献】

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本文编号：2835853