骨髓间充质干细胞向肝样细胞诱导分化的体外研究

发布时间：2020-10-16 09:02

　　 目的：利用小鼠2／3肝部分切除术(PH)后36小时再生肝组织浸出液及肝细胞生长因子(HGF)、表皮细胞生长因子(EGF)，探讨骨髓间充质干细胞体外定向肝样细胞分化的诱导条件，为肝组织工程的构建开辟种子细胞来源的新途径。 方法：采用Ficoll梯度离心和贴壁分离方法，获得昆明(I(M)小鼠骨髓间充质干细胞，在基础培养液中，分别应用2／3肝部分切除术(PH)后36小时小鼠再生肝组织浸出液、肝细胞生长因子(HGF)和表皮细胞生长因子(EGF)、以及三者联合刺激诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向肝样细胞分化。在倒置显微镜下动态观察细胞形态学的改变，应用免疫荧光法(immunofluorescence)进行肝细胞特异性标志物CK8、CK18和白蛋白检测以鉴定细胞性质。 结果：骨髓间充质干细胞(BMSCs)经2／3肝部分切除术(PH)后36小时小鼠再生肝组织浸出液、肝细胞生长因子(HGF)和表皮细胞生长因子(EGF)、以及三者联合刺激诱导后变为肝细胞样圆形，1-2周后免疫荧光染色可见分化后细胞表达肝细胞标志物CK8、CK18和白蛋白，浸出液与两种细胞生长因子联合诱导组表达升高。 结论：研究结果表明，在体外利用小鼠2／3肝部分切除术(PH)后36小时再生肝组织浸出液、肝细胞生长因子(HGF)和表皮细胞生长因子(EGF)、以及三者联合均可诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞方向分化。再生肝组织浸出液与EGF、HGF联合定向诱导有协同诱导作用。为肝组织工程的构建开辟了种子细胞来源的新途径。
【学位单位】：中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2004
【中图分类】：R329.2
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1 黄荣;山羊骨髓间充质干细胞生物学特性、冷冻保存及基因转染研究[D];南京农业大学;2011年

本文编号：2843052