CpG-ODN免疫增强作用的实验研究

发布时间：2020-10-26 00:22

　　 目的：设计含非甲基化胞嘧啶和鸟嘌呤的寡聚脱氧核糖核苷酸(CpG-ODN)，以期用足月新生儿脐血筛选出具有较强免疫增强作用的CpG-ODN；比较CpG-ODN对新生儿(早产儿和足月儿)脐血和成人外周血单个核细胞(PBMC)的增殖效应；观察CpG-ODN对孕鼠及其新生鼠、免疫抑制鼠和老年鼠体液免疫功能的影响。 方法：按不同设计原则设计5种CpG-ODN，用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法从中筛选出具有较强免疫增强作用的CpG-ODN；用MTT法观察CpG-ODN对新生儿(早产儿和足月儿)脐血和成人外周血单个核细胞增殖的差异性。用公认对正常小鼠有明显免疫增强作用的CpG1826(5’-TCCATCTCACGTTCCTGACGTT-3’)免疫孕鼠(20μg/只)、免疫抑制鼠(20μg/只)和老年鼠(20μg/只或30μg/只)，用ELISA法检测孕鼠及其新生鼠、免疫抑制鼠和老年鼠的血清IgG抗体，并取小鼠脾脏进行病理切片并HE染色，在镜下观察脾脏的细胞结构变化。 结果：筛选出1条具有较强免疫增强作用的CpG-ODN(5’-GGTGCATCGATGCAGGGGGG-3)。该条CpG-ODN对成人PBMC增殖效应最明显，其次是足月儿，但对早产儿的增殖效应不明显；CpG1826可以提高正常成年、免疫抑制鼠和老年鼠血清IgG抗体水平，对孕鼠及其子鼠血清IgG水平无明显影响；20μg/只的CpG1826剂量没有导致胎儿宫内发育迟缓(IUGR)等并发症。 结论：①MTT法是一种筛选具有免疫增殖效应CpG-ODN的理想实验方法；②新生儿脐血可作为筛选CpG-ODN免疫增殖效应的实验材料；③CpG-ODN(5’-GGTGCATCGATGCAGGGGGG-3’)具有明显的免疫增强作用，早产儿、足月儿脐血和成人外周血单个核细胞对该CpG-ODN反应具有差异性；④以20μg/只的CpG1826剂量免疫孕鼠，孕鼠及其新生鼠没有出现免疫增强作用，也未导致IUGR等不良反应；⑤CpG1826对正常成年鼠、免疫抑制鼠和老年鼠均有较强的免疫增强作用，提示CpG-ODN是一种新型的免疫佐剂，有较大的开发价值及广泛的临床应用前景。
【学位单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2003
【中图分类】：R392
【部分图文】：

2.8，J、时，3.16，J、时，4.2.对CpG一OON降解的监侧(与足月果，提示我们选择24小时为CpCpG一ODN的MTT培养时间。CpG一ooN:分别将本研究设计的理盐水)与9例足月儿的脐血共4、图4中表明:非硫代化CpG3白对照的OD值相比，差异均具白对照的0D值相比，差异亦具有差异亦有显著意义(P<0.05);05)。
【参考文献】

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本文编号：2856195