几种天然环二核苷酸作为人体佐剂作用潜力的比较

发布时间：2020-10-29 09:27

　　 目的对几种天然环二核苷酸(cyclic dinucleotide,CDN)作为人体佐剂作用的潜力进行比较。方法以相同剂量的CDN(c-di-GMP、c-di-AMP、3′3′cGAMP和2′3′cGAMP)同人体来源的单核细胞白血病细胞(human monocytic leukaemia cells,THP-1)共孵育,同时将CDN(c-di-GMP和2′3′cGAMP)与脂质体混合后同THP-1细胞共孵育,刺激5 h后,收集细胞及培养液,采用实时定量PCR及ELISA法检测IFNβ基因及蛋白的表达水平,同时检测脂质体对不同类型CDN刺激作用的影响。结果 4种CDN均能有效刺激THP-1细胞IFNβ基因及蛋白表达水平的提高,且对人体细胞作用从强到弱依次为2′3′cGAMP、3′3′cGAMP、c-di-AMP和c-di-GMP,各自之间差异有统计学意义(P 0. 01)。脂质体能显著增强典型和非典型CDN对THP-1细胞的刺激作用,差异有统计学意义(P 0. 01)。结论 4种天然CDN对人体均具有潜在的佐剂效应,从作用强度看,2′3′cGAMP是最优选择,同时脂质体能增强CDN的这种效应,为将来进一步对CDN类化合物的佐剂作用的研究奠定基础。
【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 CDN及细胞
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 细胞培养
    1.4 CDN与细胞的共孵育
    1.5 IFNβ基因m RNA转录水平的检测
    1.6 IFNβ蛋白表达水平的检测
    1.7 统计学分析
2 结果
    2.1 不同类型CDN对人体细胞IFNβ基因转录水平的影响
    2.2 不同类型CDN对人体细胞IFNβ蛋白表达的影响
    2.3 脂质体对CDN刺激作用的影响
3 讨论

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本文编号：2860707