PDGFR信号通路促进星形胶质细胞和成纤维细胞共培养时细胞簇的成团效应

发布时间：2020-10-30 13:58

　　 目的探讨血小板衍生生长因子受体(PDGFR)信号通路对小鼠脑星形胶质细胞和成纤维细胞共培养体系增殖的影响。方法取出生1～3 d的小鼠乳鼠大脑皮质培养星形胶质细胞,取脑膜培养成纤维细胞,免疫细胞化学荧光染色胶质纤维酸性蛋白(GFAP)鉴定星形胶质细胞纯度,染色纤连蛋白(FN)鉴定成纤维细胞纯度。通过向小鼠脑星形胶质细胞和成纤维细胞共培养细胞体系中加入细胞因子血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)刺激细胞或抑制剂AG1296进行干预,观察各组细胞增殖情况,Western blot检测共培养细胞系中p-PDGFR-β、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)的表达变化。结果鉴定结果显示星形胶质细胞和成纤维细胞的细胞纯度达到90%。显微镜下观察显示,加入PDGF-BB后星形胶质细胞和成纤维细胞共培养体系增殖明显并形成团块,给予抑制剂AG1296则增殖受到抑制,团块明显减少。Western blot结果显示加入PDGF-BB时,p-PDGFRβ、p-Akt表达增多(P0.01);给予抑制剂AG1296则表达减少(P0.05)。结论 PDGFR信号通路促进体外小鼠脑星形胶质细胞和成纤维细胞的增殖。
【部分图文】：

４期裴丹，李洪鹏．ＰＤＧＦＲ信号通路促进星形胶质细胞和成纤维细胞共培养时细胞簇的成团效应数字平台：ｈｔｔｐ：／／ｙｘｘｂ．ｘｊｔｕ．ｅｄｕ．ｃｎ微信公众号：西安交通大学学报医学版２结果２．１免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞及成纤维细胞免疫荧光ＧＦＡＰ和ＦＮ染色结果，传代３代以上的小鼠星形胶质细胞ＧＦＡＰ和成纤维细胞ＦＮ阳性表达高于９５％（图１）。据此确认体外培养的脑皮质星形胶质细胞和成纤维细胞纯度可进行后续实验。图１小鼠脑星形胶质细胞和成纤维细胞免疫荧光染色结果Ｆｉｇ．１Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｔａｉｎｉｎｇｏｆｍｏｕｓｅｂｒａｉｎａｓｔｒｏ－ｃｙｔｅｓａｎｄｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓＡ：星形胶质细胞标记物ＧＦＡＰ蛋白阳性表达为红色；Ｂ：成纤维细胞标记物ＦＮ蛋白阳性表达为绿色。２．２ＰＤＧＦ－ＢＢ刺激共培养体系的细胞增殖当脑膜成纤维细胞和星形胶质细胞共培养时，未加任何处理因素时，单独生长形成独立平坦的集落（图２Ａ）。用ＰＤＧＦ－ＢＢ刺激时，细胞明显增殖并聚集生长形成结节（图２Ｂ）。说明ＰＤＧＦ－ＢＢ可促进星形胶质细胞和成纤维细胞共培养体系的细胞增殖。图２ＰＤＧＦ－ＢＢ对脑星形胶质细胞和成纤维细胞共培养体系增殖的影响Ｆｉｇ．２ＥｆｆｅｃｔｏｆＰＤＧＦ－ＢＢｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｓｔｒｏ－ｃｙｔｅａｎｄｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｓｙｓｔｅｍＡ：空白对照组，即共培养体系未加任何处理因素；Ｂ：１０ｎｇ／ｍＬＰＤＧＦ－

图２ＰＤＧＦ－ＢＢ对脑星形胶质细胞和成纤维细胞共培养体系增殖的影响
【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 赵任杰;李均;;PDGF及PDGFR在肾间质纤维化中的研究进展[J];西部医学;2013年05期

【共引文献】

相关期刊论文 前1条

1 刘迎新;邹大威;耿建国;高彦彬;尚雅文;李娇阳;龚慕辛;彭麒朕;;糖肾宁对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾组织血小板衍生生长因子及受体表达的影响[J];环球中医药;2015年08期

【二级参考文献】

相关期刊论文 前3条

1 王一辰;王志平;;血小板源性生长因子在肾脏疾病的研究进展[J];国际泌尿系统杂志;2010年03期

2 戎赞华;段惠军;;血小板源性生长因子与肾脏疾病的研究进展[J];河北医药;2010年07期

3 袁向飞;陆敏;;Ras/MAPK与PI3K/Akt信号转导通路及其相互作用[J];国际检验医学杂志;2006年03期

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 Alberini CM;Cruz E;Descalzi G;Bessières B;Gao V;唐颖馨;;星形胶质细胞糖原和乳酸:学习和记忆机制探索新发现[J];神经损伤与功能重建;2017年06期

2 赵海军;李燕;卢岩;王媛;韩冰冰;王世军;;星形胶质细胞对神经元能量代谢的影响[J];卒中与神经疾病;2015年06期

3 杨茜;周华军;;反应性星形胶质细胞与轴突再生[J];国际神经病学神经外科学杂志;2015年03期

4 刘慧,王小军,胡荣,杨忠,蔡文琴;星形胶质细胞[J];生理科学进展;2004年01期

5 Nina Vardjan;Vladimir Parpura;Robert Zorec;王晶;;星形胶质细胞松散的兴奋-分泌耦合(英文)[J];神经损伤与功能重建;2016年03期

6 接琳琳;管英俊;陈燕春;周风华;赵会;丁宝龙;;星形胶质细胞与神经元间通讯的研究进展[J];解剖科学进展;2014年06期

7 ;研究人员发现星形胶质细胞可调节呼吸强度[J];中国科技信息;2010年17期

8 余涛;刘秋菊;金璐;文铁桥;;星形胶质细胞低温去分化条件[J];上海大学学报(自然科学版);2006年06期

9 朱涛,姚智,袁汉娜,陆伯刚,杨树源;脑星形胶质细胞分泌IL-6的体外研究[J];中国免疫学杂志;1998年06期

10 Janosch P.Heller;Dmitri A.Rusakov;王晶;;星形胶质细胞的形态可塑性:理解突触微环境[J];神经损伤与功能重建;2016年01期

相关博士学位论文 前10条

1 高蓓;视上核星形胶质细胞对急性腹腔高渗刺激引起的神经元反应的调节及其机制[D];第四军医大学;2008年

2 李煜兴;星形胶质细胞谷氨酸释放机制的研究[D];中国医科大学;2005年

3 王岩;损伤引起的中枢神经系统结构可塑性研究[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2005年

4 张雄;海马齿状回星形胶质细胞的长时程增强[D];浙江大学;2005年

5 陈晓科;神经递质囊泡分泌孔道的动力学特征及其调控[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2005年

6 盛建松;Bystin在反应性星形胶质细胞中的表达及其功能研究[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2006年

7 吕兰海;过氧化氢、Aβ（1-42）和Tau蛋白对两原代培养星形胶质细胞的效应对比研究[D];浙江大学;2007年

8 张猛;星形胶质细胞来源的BDNF对晚期LTP具有关键的调控作用[D];南方医科大学;2012年

9 唐文红;NDRG2调控星形胶质细胞摄取谷氨酸的作用及机制研究[D];第四军医大学;2016年

10 王革非;流感病毒诱导神经胶质细胞的病理变化及天然免疫反应[D];汕头大学;2008年

相关硕士学位论文 前10条

1 张利平;内质网应激在脂肪基质细胞诱导分化为星形胶质细胞过程中的作用[D];华北理工大学;2018年

2 程雪军;用大鼠星形胶质细胞作为饲养层制备小鼠少突胶质前体细胞的研究[D];杭州师范大学;2018年

3 王娜;星形胶质细胞TWIK-1通道调控海马神经元活动的作用研究和机制初探[D];华中科技大学;2018年

4 曹阳;三方突触STDP可塑性动力学模型研究[D];北京邮电大学;2018年

5 刘国伟;叶酸在星形胶质细胞炎症反应中的作用及其机制研究[D];山东大学;2018年

6 于秋梅;星形胶质细胞的神经干细胞特性研究[D];苏州大学;2017年

7 涂然;永生化小鼠大脑星形胶质细胞系建立[D];陕西师范大学;2016年

8 朱猛;1、2型星形胶质细胞的分离纯化培养及其生物学特性研究[D];苏州大学;2001年

9 胡遵鲁;干扰Fign基因表达对大鼠星形胶质细胞迁移的影响及机制研究[D];南通大学;2016年

10 朱喜忠;Scleraxis慢病毒载体介导hAMSCs向韧带成纤维细胞分化的体外研究[D];遵义医学院;2018年

本文编号：2862568