缺氧条件下CXCL13通过MAPK信号通路促进人骨髓间充质干细胞增殖和自噬

发布时间：2020-11-01 09:31

　　 目的探索CXC趋化因子配体13(CXCL13)对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)自噬和增殖的影响及机制。方法 hBMSC分为对照组、缺氧组、 CXCL13处理组、 CXCL13和SB203580的联合处理组。除对照组外,其余各组均在920 mL/L N_2、 30 mL/L O_2和50 mL/L CO_2建立的细胞缺氧模型下进行培养。缺氧组不进行任何处理, CXCL13处理组给予50 ng/mL CXCL13重组蛋白刺激,联合处理组则预先添加20μmol/L丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580,培养30 min后,再以50 ng/mL CXCL13刺激。分别采用噻唑蓝(MTT)法检测hBMSC增殖活性, annexinⅤ-FITC/PI双标记结合流式细胞术检测hBMSC的凋亡, Western blot法检测hBMSC的核因子κB(NF-κB)、 beclin-1蛋白水平, ELISA检测细胞裂解液自噬相关蛋白7(ATG7)的含量。结果与缺氧组及联合处理组相比, CXCL13处理组hBMSC的细胞增殖活性、 beclin-1及NF-κB蛋白水平均升高、凋亡率明显降低;细胞裂解液ATG7水平升高。结论缺氧环境下, CXCL13通过MAPK/NF-κB信号通路促进hBMSC自噬和增殖。
【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞缺氧模型和实验分组
        1.2.2 MTT法检测细胞增殖
        1.2.3 Annexin Ⅴ-FITC/PI双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡
        1.2.4 Western blot法检测hBMSC的beclin-1、 NF-κB蛋白水平
        1.2.5 ELISA检测hBMSC裂解液ATG7水平
        1.2.6 统计学分析
2 结果
    2.1 CXCL13处理促进hBMSC增殖
    2.2 CXCL13处理减少hBMSC凋亡
    2.3 CXCL13处理增加hBMSC的自噬
    2.4 CXCL13处理增加hBMSC的NF-κB蛋白表达
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本文编号：2865344