自制阻水剂在免疫组化染色中的应用

发布时间：2020-11-04 06:34

　　 正常规免疫组化染色过程中为防止试剂外溢,许多单位会使用商品化的组化笔。商品化的组化笔虽然使用方便,阻水效果好,但使用周期较短,价格高,额外增加了成本。本科室在参考相关文献经验~([1-3])的基础上,在实践中通过反复实验,自制一款阻水剂应用于日常免疫组化实验过程中,效果良好,现介绍如下。1材料与方法1. 1材料切片石蜡10 g,蜂蜡10 g,石蜡油10 g,空白唇
【部分图文】：

膏在距离组织约0．2cm处画圈2～3圈封边［1］，即可开始下一步染色。2结果使用上述自制的阻水剂对免疫组化切片进行画圈后可以获得比较满意的效果(图1、2)，能够有效的避免抗体溢到组织外，反复实验结果显示:免疫组化染色效果与使用商品化免疫组化笔相比无明显差别。注意每次制作时只需要多做一些阻水剂待其凝固后便能够长期存放置于冰箱的冷冻格中，待到使用时，从冰箱中取出，用小刀修整切面以便于画圈。①②图1使用阻水剂在组织周围画圈，滴加一抗后阻水剂封闭圈较完整，不影响一抗的孵育图2一抗过夜后PBS冲洗切片阻水剂封闭圈仍然完整没有缺口3讨论目前最常用于免疫组化染色的商品化免疫组化笔画圈时方便快捷，封圈牢固，抗体不易外溢，但也有诸如使用时产生挥发性化学性气味、价格昂贵等缺点，使用期限也较短。而本科室自制阻水剂所使用的材料如石蜡和蜂蜡都来源于病理科日常工作中，两者常温皆为无色无味的固体，稳定性较好，另一种材料石蜡油在临床工作中常被用于灌肠时润滑肠管及导尿管的润滑，价格低廉，容易获取，并且具有较低致敏性，对人体无影响，同时也具有良好的阻水作用。经本科室多次操作及镜下观察，应用于画圈的阻水剂在免疫组化实验后期切片透明处理过程中，二甲苯可完全溶解而去除其中的石蜡，经过2～3道二甲苯透明可以将阻水剂中的少量石蜡去除干净，不影响观察效果。综上所述:本科室自制的阻水剂成本低，无污染，使用方便，经多次实验对比，用自制的阻水剂代替免疫组化笔进行封圈效果良好，染色结果稳定，可以替代免疫组化笔在日常工作中的应用，值得推广。(本文承蒙江苏省人民医院病理科张炜明老师指导，特此致谢!)参考文献:

性树胶固封。接受日期:2018－10－13作者单位:海南省人民医院病理科，海口570311作者简介:陈世梁，男，主管技师。Tel:(0898)68642544，E-mail:chenshiliang168@163．com2结果103例乳腺癌前哨淋巴结冷冻切片组织结构基本完整，薄厚均匀，未出现明显皱折、裂隙及脱片现象，镜下组织结构清晰，红蓝对比鲜明，透明度较好，细胞无明显肿胀和收缩，极少有冰晶形成，接近对应冰剩组织石蜡切片(图1、2)。①②图1乳腺癌前哨淋巴结冷冻切片:组织结构清晰，红蓝对比鲜明，透明度好，无冰晶形成图2乳腺癌前哨淋巴结石蜡切片:组织结构清晰，红蓝对比鲜明，透明度清晰3讨论早期乳腺癌前哨淋巴结不同于一般淋巴结，其内含有数量不等的脂肪，脂肪与淋巴组织参杂在一起造成制作高质量的冷冻切片难度较大，因此要切好高质量的前哨淋巴结冷冻切片应注意以下几个方面。3．1冰晶问题冷冻切片出现冰晶的主要原因是没有迅速将组织冷冻到合适温度，其形成机制主要有:(1)冰晶形成与结晶核的数目和晶体形成的速度有一定关系［1］。水在－4℃时体积最大的物理性质决定了组织在－4℃停留时间越长，组织内产生的冰晶体积越大，因此要最短时间内使组织迅速冷冻降至－4℃以下，使结晶核形成快而多，使冰晶体积变小［2］。(2)组织中的水、脂肪和蛋白质在同一冷冻温度下冷冻速度不一致，在温度下降某阶段时，水在组织中容易从液体状态转化为固体状态结冰成冰晶，若此时前哨淋巴结临床与实验病理学杂志JClinExpPathol2019Mar;35(3)·163·
【参考文献】

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1 沈吟芳;郭凌川;康苏娅;吴德明;;组织化学技术中4种封边方法的比较[J];诊断病理学杂志;2013年09期

2 张海丛;何春年;徐明堂;张秀智;;多种封边法在免疫组化染色中应用的比较[J];临床与实验病理学杂志;2012年03期

3 于兰;何松;陈亚丽;;介绍一种免疫组化封边法[J];临床与实验病理学杂志;2009年01期

【共引文献】

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2 沈吟芳;郭凌川;康苏娅;吴德明;;组织化学技术中4种封边方法的比较[J];诊断病理学杂志;2013年09期

3 张海丛;何春年;徐明堂;张秀智;;多种封边法在免疫组化染色中应用的比较[J];临床与实验病理学杂志;2012年03期

4 赵剑萍;高冬明;;骨髓活检组织石蜡连片在免疫组化中的应用[J];中国实用医药;2012年08期

【二级参考文献】

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本文编号：2869761