脾气虚证和脾不统血证模型大鼠脾主肌肉实质的探讨

发布时间：2020-11-15 12:43

　　 目的研究脾气虚证和脾不统血证模型大鼠骨骼肌组织线粒体能量代谢变化,探讨中医脾主肌肉理论的内涵实质。方法将48只SD雄性大鼠按随机数表法分为正常对照组、低分子肝素钠组、脾气虚组和脾不统血组,每组12只。复制脾气虚证和脾不统血证大鼠模型,测定各组大鼠骨骼肌ATP含量、线粒体呼吸链复合物(ComplexⅠ、ComplexⅡ、ComplexⅢ、ComplexⅣ)活性、柠檬酸合酶(CS)活性、mt DNA拷贝数、COXⅣ蛋白和Cyt-C蛋白及其mRNA表达量变化。结果与正常对照组比较,中期和末期脾气虚组和脾不统血组大鼠骨骼肌的ATP含量、线粒体复合物活性、CS活性、mt DNA拷贝数、COXⅣ蛋白及其mRNA表达量均降低,Cyt-C蛋白及其mRNA表达量均升高(P 0. 05,P 0. 01);与脾气虚组比较,中期和末期脾不统血组大鼠骨骼肌ATP含量、CS活性均降低(均P 0. 05);中期脾不统血组大鼠骨骼肌ComplexⅠ、ComplexⅡ、ComplexⅢ活性降低,末期脾不统血组大鼠骨骼肌ComplexⅠ、ComplexⅢ、ComplexⅣ活性降低(P 0. 05,P 0. 01);中期脾不统血组大鼠骨骼肌mt DNA拷贝数升高(P 0. 05);脾不统血组大鼠骨骼肌COXⅣ、Cyt-C蛋白及其mRNA表达量比较,差异无统计学意义(均P 0. 05)。结论脾气虚证大鼠和脾不统血证大鼠骨骼肌线粒体能量代谢障碍存在多方面的影响变化,且脾气虚证发展成为脾不统血证的过程中,大鼠骨骼肌能量代谢障碍逐渐加重。
【部分图文】：

·220·中国中西医结合杂志2019年2月第39卷第2期CJITWM，February2019，Vol．39，No.2注:与正常对照组比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与脾气虚组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01;与低分子肝素钠组比较，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01;CON为正常对照组;CON+LMWH为低分子肝素钠组;SQD为脾气虚组;SQD+LMWH为脾不统血组;图2、4同图1各组大鼠不同时期骨骼肌线粒体复合物活性百分比比较3各组大鼠骨骼肌CS活性变化(图2)与正常对照组比较，中期和末期的脾气虚组和脾不统血组大鼠骨骼肌CS的活性均降低(P＜0.01);与脾气虚组比较，中期和末期的脾不统血组大鼠骨骼肌CS的活性有所降低(P＜0.05);与低分子肝素钠组比较，中期和末期的脾不统血组大鼠骨骼肌CS活性呈降低趋势(P＜0.01)。注:与正常对照组比较，*P＜0.01;与脾气虚组比较，△P＜0.05;与低分子肝素钠组比较，▲P＜0.01图2各组大鼠不同时期骨骼肌CS百分比比较4各组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数比较(表2，图3)与正常对照组比较，中期和末期脾气虚组和脾不统血组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数降低(P＜0.05，P＜0.01);与脾气虚组比较，中期脾不统血组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数升高(P＜0.05)，而末期脾不统血组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数较脾气虚组差异无统计学意义(P＞0.05);与低分子肝素钠组比较，中期和末期脾不统血组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数差异无统计学意义(P＞0.05)。注:A为中期扩增曲线图;B为末期扩增曲线图图3各组大鼠不同时期骨骼肌mtDNA拷贝数相对含量比较5各组大鼠骨骼肌组织COXⅣ

＜0.01图2各组大鼠不同时期骨骼肌CS百分比比较4各组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数比较(表2，图3)与正常对照组比较，中期和末期脾气虚组和脾不统血组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数降低(P＜0.05，P＜0.01);与脾气虚组比较，中期脾不统血组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数升高(P＜0.05)，而末期脾不统血组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数较脾气虚组差异无统计学意义(P＞0.05);与低分子肝素钠组比较，中期和末期脾不统血组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数差异无统计学意义(P＞0.05)。注:A为中期扩增曲线图;B为末期扩增曲线图图3各组大鼠不同时期骨骼肌mtDNA拷贝数相对含量比较5各组大鼠骨骼肌组织COXⅣ蛋白、Cyt-C蛋表达量比较(图4)与正常对照组比较，中期和末期脾气虚组和脾不统血组大鼠骨骼肌COXⅣ蛋白表达量降低(P＜0.01)，Cyt-C蛋白表达量升高(P＜0.05，P＜0.01);与脾气虚组比较，脾不统血组大鼠骨骼肌COXⅣ蛋白和Cyt-C蛋白表达量差异无统计学意义(均P＞0.05);与低分子肝素钠组比较，中期和末期脾不统血组大鼠骨骼肌组织中的COXⅣ蛋白表达量均呈降低趋势(P＜0.05)，Cyt-C蛋白表达量均呈升高趋势(P＜0.05，P＜0.01)。注:与正常对照组比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与低分子肝素钠组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01图4各组大鼠不同时期骨骼肌组织蛋白相对表达量比较6各组大鼠骨骼肌组织COXⅣ和Cyt-CmＲNA相对表达量比较(表3，图5)与正常对照组比较，中期和末期的脾气虚组和脾不统血组大鼠骨骼肌表2各组大鼠不同时期骨骼肌mtDNA拷贝数比较(x±s)组别n中期Ct(

·220·中国中西医结合杂志2019年2月第39卷第2期CJITWM，February2019，Vol．39，No.2注:与正常对照组比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与脾气虚组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01;与低分子肝素钠组比较，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01;CON为正常对照组;CON+LMWH为低分子肝素钠组;SQD为脾气虚组;SQD+LMWH为脾不统血组;图2、4同图1各组大鼠不同时期骨骼肌线粒体复合物活性百分比比较3各组大鼠骨骼肌CS活性变化(图2)与正常对照组比较，中期和末期的脾气虚组和脾不统血组大鼠骨骼肌CS的活性均降低(P＜0.01);与脾气虚组比较，中期和末期的脾不统血组大鼠骨骼肌CS的活性有所降低(P＜0.05);与低分子肝素钠组比较，中期和末期的脾不统血组大鼠骨骼肌CS活性呈降低趋势(P＜0.01)。注:与正常对照组比较，*P＜0.01;与脾气虚组比较，△P＜0.05;与低分子肝素钠组比较，▲P＜0.01图2各组大鼠不同时期骨骼肌CS百分比比较4各组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数比较(表2，图3)与正常对照组比较，中期和末期脾气虚组和脾不统血组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数降低(P＜0.05，P＜0.01);与脾气虚组比较，中期脾不统血组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数升高(P＜0.05)，而末期脾不统血组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数较脾气虚组差异无统计学意义(P＞0.05);与低分子肝素钠组比较，中期和末期脾不统血组大鼠骨骼肌mtDNA拷贝数差异无统计学意义(P＞0.05)。注:A为中期扩增曲线图;B为末期扩增曲线图图3各组大鼠不同时期骨骼肌mtDNA拷贝数相对含量比较5各组大鼠骨骼肌组织COXⅣ
【参考文献】

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