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Wnt3a基因对脐血来源CD34~+造血干/祖细胞体外扩增及定向分化作用的研究

发布时间:2020-12-09 15:07
  Wnt家族蛋白及其受体、调节蛋白等共同组成了复杂的信号通路,在动物的发育与干细胞命运的调控方面都起着重要的作用。Wnt信号通路不仅直接促进造血干细胞的自我更新,而且还通过影响造血干细胞微环境而间接地影响造血干细胞的功能。Wnt家族成员之一Wnt3a在造血干/祖细胞自我更新的过程中发挥着重要的作用。鉴于此我们通过构建携带Wnt3a基因的腺病毒感染原代小鼠骨髓基质细胞,建立转基因滋养层细胞。通过与脐血CD34+造血干/祖细胞的共培养研究转基因滋养层细胞扩增CD34+造血干/祖细胞的作用。实验结果显示,与普通滋养层加细胞因子组相比,转基因滋养层加细胞因子组培养的CD34+造血干/祖细胞集落形成能力(CFC)是其1.55±0.06倍;混合集落形成能力是其1.95±0.26倍;高增殖潜能集落形成能力(HPP-CFC)是其1.45±0.40倍;LTC-IC活性是其3.83±0.86倍。结果表明Wnt3a转基因滋养层细胞通过分泌Wnt3a蛋白,实现其体外扩增造血干/祖细胞的作用。 我们在转Wnt3a滋养层细胞成功培养扩增CD34... 

【文章来源】:中国人民解放军军事科学院北京市

【文章页数】:100 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
中文摘要
英文摘要
缩略语表
前言
主要仪器
主要试剂
第一部分 转 Wnt3a小鼠骨髓基质细胞滋养层的建立与检测
    第一节 Wnt3a基因的克隆
        材料与方法
        实验结果
    第二节 pAd-Wnt3a重组腺病毒质粒的构建
        材料与方法
        实验结果
    第三节 转Wnt3a小鼠骨髓基质细胞滋养层的建立
        材料与方法
        实验结果
    讨论
    参考文献
+造血干/祖细胞扩增作用">第二部分 转Wnt3a小鼠骨髓基质细胞滋养层对 CD34+造血干/祖细胞扩增作用
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    参考文献
+造血干/祖细胞的红系分化潜能的影响">第三部分 转Wnt3a小鼠骨髓基质细胞滋养层对扩增后 CD34+造血干/祖细胞的红系分化潜能的影响
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    参考文献
+造血干/祖细胞红系分化潜能机制的初步探讨">第四部分 Wnt3a影响 CD34+造血干/祖细胞红系分化潜能机制的初步探讨
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    参考文献
总结
致谢
博士期间已完成或发表的论著
附录 博士期间发表的部分论著


【参考文献】:
期刊论文
[1]Wnt3a转基因基质细胞的建立及其对脐血CD34+造血干/祖细胞扩增作用的研究[J]. 师伟,韩姝,李艳华,谢小燕,施双双,陈琳,白慈贤,闫舫,南雪,王韫芳,裴雪涛.  生物化学与生物物理进展. 2005(09)
[2]骨髓来源基质细胞促进造血重建的实验研究[J]. 施小凤,傅晋翔,朱孝中.  中国血液流变学杂志. 2004(01)



本文编号:2907057

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