重组hIGF-I工程菌的发酵及产物纯化的研究

发布时间：2020-12-11 11:07

　　胰岛素样生长因子-I（IGF-I）是一种多功能的细胞增殖调控因子。重组人胰岛素样生长因子-I（rhIGF-I）是一种很有发展潜力与广阔临床应用前景的药物，现代生物技术的发展为重组hIGF-I的大规模生产提供了可能途径。 基因工程菌的发酵技术是基因工程药物大规模生产的必备技术。本研究构建了重组hIGF-I工程菌E.coli BL21（DE3）/pRSET-IGF，对该重组工程菌的生长及产物的表达规律进行了探索，并在此基础上进行高密度发酵的初步研究，菌体最终发酵密度达OD₆₀₀值20，表达的重组蛋白占菌体总蛋白的25.4％，初步形成了一套重组hIGF-I工程菌发酵的工艺。 重组hIGF-I在重组工程菌E.coli BL21（DE3）/pRSET-IGF中以包涵体的形式表达。针对这一重组蛋白包涵体的洗涤、变性、复性以及最终的分离纯化过程进行研究。实验结果表明，洗涤的包涵体纯度可达67.8％；8mol/L尿素及10mmol/L DTT可以使包涵体充分溶解。在复性过程中，采用分步透析逐渐降低尿素浓度的方法，可以有效地提高复性的效率；与此同时，在复性液中加入氧化型... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
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中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 重组hIGF-1工程菌的发酵研究
    材料与方法
    结果
    讨论
第二部分 重组人胰岛素样生长因子-Ⅰ的纯化研究
    材料与方法
    结果
    讨论
结论
参考文献
综述 重组人胰岛素样生长因子-Ⅰ研究进展
致谢
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【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2910424