小鼠抗猪生长抑素单克隆抗体的制备与鉴定

发布时间：2020-12-15 10:07

　　目的制备生长抑素(SS)单克隆抗体(mAb),并对其生物学特性进行鉴定。方法用偶联方法制备SS免疫原复合物,用免疫原复合物免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备SS mAb。用间接ELISA检测mAb的亚型及效价,用定量ELISA检测mAb 2E7的含量,用间接ELISA检测mAb的特异性和mAb在体外、体内对SS的中和作用。结果获得两株能稳定分泌SS mAb的杂交瘤细胞株2A5、 2E7,两株抗体的亚型均为IgG1,2A5效价为1∶100 000,2E7效价为1∶1 000 000, 2E7含量为5.4 mg/mL。SS mAb只特异性地和SS纯品及SS免疫原复合物发生免疫反应,不和单纯载体蛋白(牛血清白蛋白)发生免疫反应,也不和其他肽类物质如生长激素、胰岛素、胃泌素发生交叉反应。SS mAb在体外能抑制SS和兔抗SS抗体的免疫反应,注射到体内能中和机体内的SS,从而促进生长激素的分泌。使循环血中生长激素的含量显著增加。结论成功制备了SS mAb,该mAb浓度大、效价高、特异性强,对SS功能具有较强的免疫中和作用。 

【文章来源】：细胞与分子免疫学杂志. 2019年04期 北大核心

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 SS免疫原复合物的制备
        1.2.2 BALB/c小鼠的免疫
        1.2.3 细胞融合及阳性克隆的筛选
        1.2.4 SS mAb的大量制备
        1.2.5 SS mAb效价检测
        1.2.6 SS mAb含量的检测
        1.2.7 SS mAb IgG亚型检测
        1.2.8 SS mAb的特异性检测
        1.2.9 体内检测SS mAb2E7对SS免疫中和性
        1.2.10 体外检测抗SS mAb对SS免疫中和性
2 结果
    2.1 获得抗SS mAb杂交瘤细胞株
    2.2 SS mAb 2E7含量测定
    2.3 mAb特异性较好
    2.4 SS mAb体外中和实验
    2.5 小鼠静脉注射抗SS mAb增加小鼠血清生长激素水平
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2918097