睡眠剥夺小鼠模型的建立及宁心安神法的干预作用

发布时间：2017-04-08 15:29

  本文关键词：睡眠剥夺小鼠模型的建立及宁心安神法的干预作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：不寐,在中国古代又有“目不瞑”、“不得眠”等称谓,现代人们常以失眠来称此病证,主要是指入睡困难,或者睡眠过程的维持出现障碍(比如易醒、早醒以及醒后难以再入睡等),而导致的睡眠质、量的降低,不能满足机体的正常的生理需要,对个体的日常生活、社会功能产生较大影响,降低个体生活质量。本课题结合导师前期失眠的课题研究来继续探讨失眠的模型建立、中药复方干预及其作用机制的研究。理论研究:《黄帝内经》认为神与睡眠之间有着复杂交织的紧密联系,神主宰着生命体的一切活动;人体阴阳的盛衰变化、营卫二气的昼夜循行及跷脉的盛衰都与人体的睡眠功能关系密切。营卫是魂魄活动的基础,其循环运行、阴阳出入的规律是睡眠活动产生的关键所在,营卫与昼夜阴阳消长节律同步的活动规律也保证了睡眠的生理自律性。不寐与许多病因有关,其病理机制也十分复杂,或虚或实,或心肝阴血虚而致虚热内扰、或心胆气虚、或心肾不交,或肝郁化火、或胆郁痰扰、或心火旺盛烧灼心神等。都能使机体产生不寐病证,同时因为热扰心神而多伴见心烦躁动之症。对于本病的治疗应该详明其病因病机,辨证施治。实验研究:方法:先通过模型筛选的方法选出适宜的小鼠睡眠剥夺模型,然后研究三草安神方的促眠药效学研究,再根据结果选用轻触叠加换笼的方法作为小鼠睡眠剥夺的方法,选用三草安神方作为中药复方的干预用药。将小鼠适应性喂养后,进行水迷宫初筛,淘汰体力差、学习记忆能力落后的小鼠;挑选出60只小鼠随机分为空白对照组、模型组、西药对照组、三草安神方高剂量组、三草安神方低剂量组五组,每组12只。适应性喂养过程中保持单笼饲养方式,光照:黑暗=12h:12h,室内温度控制在(24±2)℃。每天称重、记录、灌胃给药,每天观察记录小鼠的体重、动作行为、精神状况、皮毛光泽度、饮食饮水量、大小便等情况。造模。采用Morris水迷宫实验检测各组实验小鼠学习记忆能力的改变情况。采用自主活动箱实验来检测各组实验小鼠动作、活动改变情况。采用组织化学法检测各组实验小鼠脑组织的自由基(SOD、MDA)和NO、NOS以及胆碱酯能(Ch AT、TCh E)水平的变化。结果:与空白组比较,自主活动试验中合并组、轻触组小鼠的活动的次数和活动的总路程明显下降(P0.05);换笼组有降低趋势,但差异不显著。在水迷宫定位航行能力试验中,换笼组、轻触组、合并组小鼠,其上平台的潜伏期与游泳的总的路程较空白组明显延长(P0.05,P0.01);在空间探索能力检测中,结果与前实验结果保持一致,换笼组、轻触组、合并组小鼠的穿越平台的次数、第一象限时间明显减少及首次抵原平台时间明显增长(P0.05,P0.01)。在促眠实验中结果表明三草安神方有非常好的镇静催眠作用,但需要达到一定的剂量。经过睡眠剥夺的小鼠一般指标情况要差于空白组小鼠,体重增长量也要低于空白组小鼠,但是西药组和三草安神方大剂量组能有效改善此种状况。在水迷宫试验中,三草安神方干预组的小鼠穿越平台次数及目标象限时间明显增加,第1次抵原平台时间明显缩短,但各组间差异显著性不一(P0.01,P0.05)。经过三草安神方干预的小鼠SOD活性上升(P0.05),MDA含量下降(P0.05),NO及NOS含量降低(P0.05),Tch E活性及Ch AT活性明显升高(P0.05)。结论:1.轻拍合并换笼法是安全、可靠、可行且经济方便适用的睡眠剥夺方法。2.三草安神方有显著的镇静催眠作用,高剂量的三草安神方作用显著。3.三草安神方能有效改善小鼠睡眠质量,增强学习记忆能力。
【关键词】：睡眠剥夺 自由基 神经递质
【学位授予单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R-332;R256.23
【目录】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-11
• 英文缩略词表11-12
• 前言12-14
• 第一部分 理论研究14-32
• 1 中医对寤寐的认识14-17
• 1.1 神与寤寐14-15
• 1.2 阴阳变化与寤寐15-16
• 1.3 营卫循行与寤寐16-17
• 1.4 跷脉盛衰与寤寐17
• 2 中医对不寐的辨治17-26
• 2.1 不寐的病因病机17-22
• 2.2 不寐的治疗22-26
• 3 现代医学对失眠的认识26-30
• 3.1 失眠机制及病因研究26-28
• 3.2 失眠症的治疗28-30
• 4 失眠与学习记忆关系30-32
• 第二部分 实验xO究32-49
• 实验1 睡眠剥夺小鼠模型的建立及筛选32-36
• 1.1 实验材料32
• 1.2 实验方法32-35
• 1.3 实验结果35-36
• 实验2 三草安神方促眠作用的实验研究36-39
• 2.1 实验材料36-37
• 2.2 实验方法37-38
• 2.3 实验结果38-39
• 实验3 三草安神方对睡眠剥夺小鼠一般特征及学习记忆的影响39-46
• 3.1 实验材料39-40
• 3.2 实验方法40-43
• 3.3 实验结果43-46
• 实验4 三草安神方对睡眠剥夺小鼠脑内自由基、NO、NOS及学习记忆相关胆碱能神经递质的影响46-49
• 4.1 实验材料46
• 4.2 实验实施46-47
• 4.3 实验结果47-49
• 讨论49-54
• 1 睡眠剥夺小鼠模型的评价49-50
• 1.1 失眠动物模型研究现状49
• 1.2 动物模型的评价49-50
• 2 宁心安神法对小鼠的干预作用50-54
• 结论54-55
• 参考文献55-62
• 附录62-70
• 计算公式62-63
• 综述63-70
• 参考文献66-70
• 致谢70

【参考文献】

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本文编号：293176