蝮蛇毒纤溶酶的分离纯化和性质研究

发布时间：2020-12-26 21:27

　　目的：从江浙蝮蛇毒中分离纯化无出血作用的纤溶酶，研究其理化性质，分析末端氨基酸序列，为进一步获得cDNA及全序列分析、基因克隆与表达及临床应用研究奠定基础。方法：应用Sephadex G-75，DEAE Sepharose Cl-6B柱层析分离纯化蝮蛇毒纤溶酶，用纤维蛋白平板测纤溶活性、pH对酶活性的影响、抑制剂对酶活性的影响。用PAGE结合纤维蛋白覆盖法定位纤溶组分电泳迁移率。SDS-PAGE测定分子量，IEF测定等电点，SDS-PAGE分析纤溶酶对纤维蛋白（原）肽链水解特异性。用浊度法研究其对人富血小板血浆由ADP诱导的血小板聚集的影响。发色底物法测其对底物S-2238、S-2251的Km值。结果：用PAGE结合纤维蛋白覆盖法定位测定江浙蝮蛇毒中至少有电泳迁移率为0.159、0.27、0.508、0.841的四个纤溶组分。从江浙蝮蛇毒中分离纯化到一个电泳迁移率为0.841，分子量为23.8ku，等电点为4.875，无出血毒性，对热稳定的纤溶酶。EDTA和β-巯基乙醇能抑制其活性并改变其空间结构，Cu²⁺、Co²⁺也抑制其活性，PMSF、P... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
论 文
    1. 文中主要英文缩写
    2. 中文摘要、关键词
    3. 英文摘要、关键词
    4. 前言
    5. 材料与仪器
    6. 实验步骤与方法
    7. 结果
    8. 讨论
    9. 结论
    10. 致谢
    11. 参考文献
综 述
    1. 前言
    2. 蛇毒纤维蛋白（原）水解酶
    3. 蛇毒纤溶酶原激活剂
    4. 临床应用与研究
    5. 前景与展望
    6. 参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]眼镜蛇毒纤维蛋白原溶解因子的纯化及理化性质的研究[J]. 朱正光,吴曙光.  中国生物化学与分子生物学报. 1999(05)
[2]五步蛇毒纤溶组分Ⅱ对大鼠颈动脉血栓的溶栓作用[J]. 陈家树,俞励平,梁秀霞,梁陆光.  中国药理学通报. 1998(05)
[3]蛇毒纤溶酶的体内过程及药物代谢动力学研究[J]. 沈子龙,汪笑菲,廖志勇,王红,李晓祥.  中国药科大学学报. 1997(02)
[4]蛇毒纤维蛋白原水解酶[J]. 毛建平,孙志贤.  动物学杂志. 1997(02)
[5]蚓激酶生物活性检测方法的研究[J]. 郝苏丽,沈佳.  中国药事. 1996(06)
[6]尖吻蝮蛇毒纤溶酶的柱层析分离[J]. 雷丹青.  中国生化药物杂志. 1996(04)
[7]长白蝮蛇毒纤溶组分的纯化及理化性质的研究[J]. 陈子易,王晓辉,王瑛珏,何宝俊.  中国医科大学学报. 1992(05)
[8]短尾蝮蛇毒柱层析分离及酶活性和生理活性的测定[J]. 韦世秀,汤圣希.  广西医学院学报. 1991(01)
[9]蛇毒纤维蛋白溶解酶活力的试管定量测定法[J]. 唐绍庆,韦世秀,汤圣希.  中国药理学与毒理学杂志. 1987(04)
[10]蝮蛇蛇毒类纤溶酶的分离纯化及一些特性的研究[J]. 舒雨雁,洪息君,储开疆,李曼玲,班建东,汤圣希.  广西医学院学报. 1987(01)



本文编号：2940480