球形幽门螺杆菌高表达基因的筛选及其克隆与真核表达

发布时间：2020-12-26 23:13

　　目的：从基因转录水平了解球形幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）基因表达的变化，选择在球形菌中相对高表达的两个基因克隆入真核表达载体并检测其表达，为抗球形菌DNA疫苗的研制奠定基础。 方法：1．幽门螺杆菌标准株NCTC11637和2株临床分离株，经抗生素—灭滴灵诱导球变。提取等菌量螺旋形和球形Hp的RNA，RT-PCR扩增Hp 25种基因，这些基因包括毒力基因（kat、aphA、rdxA、frxA、cysS、sodB、ureB、glmM、cagA、vacA、fldA、iceAl、hpaA、fliD、napA、oipA、alpAB、babB、hopZ）；看家基因（scoB、atpD、glnA、recA）和功能不明的外膜蛋白基因（hopW、hopX）。扩增产物经分子定量成像系统进行扫描定量。2．选择表达变化较小的两个基因（即相对高表达基因）glmM、oipA，将其全长基因克隆入T载体进行序列测定，再将其开放读码框架（ORF）克隆入真核表达载体pVAX1。重组质粒glmM／pVAX1、oipA／pVAX1经大量扩增后，瞬时转染胃腺癌细胞系SGC-7901，用pSE... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 球形与螺旋形幽门螺杆菌基因表达差异比较
    材料与方法
    结果
    讨论
第二部分 幽门螺杆菌毒力基因oipA和glmM的克隆及真核表达
    材料与方法
    结果
    讨论
结论
参考文献
综述
致谢



本文编号：2940620