蛋白激酶9在约氏疟原虫生长发育中的作用

发布时间：2020-12-29 14:10

　　目的探究蛋白激酶9 （PK9）在约氏疟原虫生长发育中的作用。方法基于疟原虫PlasmoDB数据库,查找约氏疟原虫致死株17XL （Py17XL）的PK9序列信息, BLAST比对Py PK9和恶性疟原虫PK9（Pf PK9）以及人蛋白激酶p78的同源性。提取Py17XL株野生型（WT）基因组DNA,设计引物, PCR扩增PK9基因。采用CRISPR-Cas9技术,将同源臂与sgRNA序列一起连接到PYC-MCS质粒中,构建PK9基因敲除（PK9KO）重组质粒。重组质粒电转至Py17XL虫株内,经乙胺嘧啶筛选、克隆,进行PCR鉴定和测序。10只雌性BALB/c小鼠随机分为WT感染组和PK9KO感染组,每组5只,重复3次实验。每鼠腹腔注射1×105个红内期疟原虫,每隔24 h取血检测小鼠原虫血症,观察小鼠存活情况。200只3～5日龄的斯氏按蚊随机分为WT感染小鼠吸血组和PK9KO感染小鼠吸血组,每组100只。于吸血8 d后解剖蚊胃,每组随机选取15只斯氏按蚊进行解剖,测定蚊胃中卵囊的数量。10只雌性BALB/c小鼠随机分为WT子孢子感染组和PK9KO子孢子感染组,每组5只,重复2次实验。每... 

【文章来源】：中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2019年03期 北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

PK9缺失对Py17XL蚊期疟原虫卵囊数量变化的影响6050WT感染小鼠WTinfectedmicePK9KO感染小鼠PK9KOinfectedmice卵Numbera：P>0.05


本文编号：2945774