抗HSV-2 McAb可变区基因的克

发布时间：2020-12-29 19:16

　　单纯疱疹病毒（HSV）可导致多种严重疾病，其中Ⅱ型病毒（HSV-2）引起的性传播疾病发病率有逐年上升的趋势。在抗病毒治疗方面，以单克隆抗体为主的生物疗法具有显著疗效。但是由于完整的鼠源性McAb分子具有分子量大，组织穿透性差，免疫原性强等缺点，在人体治疗中难以阻断病毒“峡谷”（Canyon）表面的抗原、受体结合位点，并易引起人抗鼠抗体反应。近年兴起的基因工程技术，为鼠抗体的基因工程改建和抗体分子小型化，提供了有力的技术手段。 本文从分泌高中和活性和高保护性的抗HSV-2鼠McAb杂交瘤细胞系CHA9中提取mRNA，以Oligo（dT）₁₅为引物，逆转录合成cDNA，以此作模板，用合成的特异性鼠抗体通用引物进行PCR，扩增出CHA9V_H基因片段，并克隆至PUC18载体中，挑取阳性重组克隆，采用双脱氧链终止法进行核苷酸序列分析，结果表明：所克隆的基因全长360bp，编码120个氨基酸，含有维持抗体结构的半胱氨酸，序列内 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：104 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
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前言
文献回顾
    基因工程抗体研究进展
        一、基因工程抗体制备的结构基础
        二、嵌合抗体
        三、重构型抗体
        四、单域抗体
        五、单链抗体
    噬菌体抗体库技术研究进展
        一、噬菌体抗体库技术的兴起
        二、抗体库载体系统的改进
        三、“天然”抗体库的问世
        四、半人工合成抗体库的组建
        五、抗体库技术的发展趋势
研究内容
    第一部分 CHA9可变区基因的克隆及序列分析
        材料与方法
        结果
        讨论
    第二部分 CHA9单链抗体基因的构建
        材料与方法
        结果
        讨论
    第三部分 CHA9单链抗体的表达及初步鉴定
        材料与方法
        结果
        讨论
小结
致谢
参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]抗HFRSV鼠／人嵌合抗体基因的构建[J]. 祝道成,阎岩,汪力亚,徐志凯,尹文,汪美先,姜绍谆,吴兴安,李以莞,张拥辉.  细胞与分子免疫学杂志. 1995(02)
[2]设计抗体研究进展[J]. 陈文杰,史常志.  国外医学.临床生物化学与检验学分册. 1995(01)
[3]丝状噬菌体表面呈现技术[J]. 陈苏民.  国外医学(分子生物学分册). 1994(05)
[4]单克隆抗体技术新进展[J]. 薛生,朱元晓,沈倍奋.  国外医学(免疫学分册). 1993(04)
[5]单克隆抗体治疗单纯疱疹性角膜炎的临床观察[J]. 杨良户,秦克锋,喻启桂,于纯智,高谦,王海涛,郑仁瑞,马吉献,汪美先,姜绍谆.  眼科研究. 1992(02)
[6]单纯疱疹病毒糖蛋白单克隆抗体对致死性感染BALB/c幼鼠的被动保护作用[J]. 刘雪雁,汪美先,秦克锋,喻启桂,黄艳.  细胞与分子免疫学杂志. 1991(04)
[7]基因重组制备鼠/人嵌合McAb研究进展[J]. 程云,汪美先,杨守纯.  细胞与分子免疫学杂志. 1990(03)
[8]抗单纯疱疹病毒McAb的研究——Ⅲ.McAb的体外中和作用及动物体内保护作用[J]. 高谦,姜绍谆,马文煜,戴敦穗,汪美先.  中华微生物学和免疫学杂志. 1985 (04)



本文编号：2946156