戊型肝炎病毒ORF2抗原的制备及其免疫原性评价

发布时间：2021-01-01 18:02

　　目的制备戊型肝炎病毒（hepatitis E virus,HEV）ORF2抗原,并对其免疫原性进行分析。方法通过基因合成获得HEV ORF2目的基因,构建重组杆状病毒,并在sf9昆虫细胞中优化表达;采用超声、硫酸铵沉淀及层析纯化HEV ORF2蛋白,免疫小鼠分析其免疫原性。结果制备的重组杆状病毒滴度为1×108 PFU/m L;重组蛋白表达条件MOI为1,收获时间为5 d时,表达量最高为20 mg/L;通过纯化获得HEV ORF2蛋白纯度> 95%;其疫苗组血清特异性抗体效价与PBS对照组比较差异有统计学意义（P <0. 05）。结论成功表达并纯化了HEV ORF2蛋白,该纯化方法可获得纯度较高的目的蛋白,且制备的HEV ORF2蛋白具有很好的免疫原性,可用于制备和开发预防性疫苗。 

【文章来源】：中国生物制品学杂志. 2019年06期

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 抗体、细胞及质粒
    1.2 实验动物
    1.3 主要试剂及仪器
    1.4 目的基因获取及重组杆粒的构建
    1.5 重组杆毒的制备
    1.6 HEV ORF2表达条件的优化
    1.7 HEV ORF2蛋白的表达及纯化
    1.8 HEV ORF2蛋白免疫原性检测
    1.9 统计学分析
2 结果
    2.1 重组杆粒测序
    2.2 重组杆病毒毒滴度
    2.3 HEV ORF2蛋白表达参数
    2.4 病毒感染后细胞浓度及活率的变化
    2.5 HEV ORF2蛋白纯化结果
    2.6 HEV ORF2免疫原性
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Chronic hepatitis E: A brief review[J]. Arvind R Murali,Vikram Kotwal,Saurabh Chawla.  World Journal of Hepatology. 2015(19)



本文编号：2951744