Cre-LoxP技术构建肝脏特异性HIF-2α基因敲除小鼠模型

发布时间：2021-01-04 11:09

　　目的探讨采用Cre-LoxP技术构建肝脏特异性HIF-2α基因敲除小鼠模型的可行性。方法由美国Jackson实验室引进loxP标记的HIF-2α基因小鼠,采用Cre/loxP重组酶系统和Alb-Cre转基因小鼠,通过多次繁殖杂交,建立肝脏特异性HIF-2α基因敲除小鼠模型。利用PCR技术鉴别小鼠基因型,并用RT-qPCR检测小鼠肝脏、脂肪及肌肉组织HIF-2αmRNA水平,同时检测野生型小鼠和Alb-Cre⁺/HIF-2α^fl/fl的纯合子小鼠血糖、血脂以及肝功能水平。3组HIF-2αmRNA数据比较采用单因素方差分析和Turkey检验。结果 PCR法成功检测出子代小鼠基因型,包括Alb-Cre⁺/HIF-2α^fl/fl和Alb-Cre^-/HIF-2α^fl/fl纯合子小鼠。肝脏HIF-2α基因敲除鼠肝脏组织HIF-2αmRNA表达量为0.10±0.02,明显低于野生型小鼠的1.00±0.10（HSD=-1.87,P<0.05）。结论采用Cre-Lox... 

【文章来源】：中华肝脏外科手术学电子杂志. 2019年03期

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
材料与方法
    一、材料
        1. 动物:
        2. 主要试剂:
    二、方法
        1. 肝脏特异性敲除小鼠构建:
        2. 小鼠基因型鉴定:
        3. 小鼠HIF-2α基因m RNA水平检测:
        4. 小鼠腹腔内葡萄糖耐量实验 （intraperitoneal glucose tolerance test, IPGTT） :
        5. 小鼠腹腔内胰岛素耐量实验 （intraperitoneal insulin tolerance test, IPITT） :
        6. 小鼠血脂检测:
        7. 小鼠肝功能检测:
    三、统计学方法
结果
    一、小鼠基因型鉴定结果
    二、转录水平验证肝脏HIF-2α基因被敲除
    三、IPGTT和IPITT结果
    四、血脂和肝功能
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Epidemic of non-alcoholic fatty liver disease and hepatocellular carcinoma[J]. Adnan Said,Aiman Ghufran.  World Journal of Clinical Oncology. 2017(06)



本文编号：2956665