原代肝细胞的分离培养及HBV感染肝细胞模型的建立

发布时间：2021-01-04 15:30

　　乙型肝炎是一种由病毒引起的慢性疾病，不易彻底治愈，并随着病情的发展有可能恶化成肝硬化、肝癌；这种疾病在我国仍有较高的感染率。因此，对乙型肝炎病毒（Hepatitis B. virus, HBV）的研究无疑有着重要的意义。自1965年Blumberg等发现乙型肝炎病毒表面抗原，到1997年病毒全基因组的克隆和测序完成，人们对HBV的基因组成和抗原的结构、生物特性及其生命周期的认识迅速发展。但因缺乏体外的增殖系统和易获得的动物模型，细胞模型，HBV感染肝脏的早期机理研究进展较为缓慢；从而在一定程度上影响乙型肝炎及其相关肝病的基础和临床研究。在众多新近发展起来的研究方法中，建立一个理想的细胞模型是了解感染机理的有效途径之一。由于人的肝组织来源有限，而且HBV有很强的宿主专一性。实验选择亚洲树鼩作为原代肝细胞的供体，它具有与人源肝细胞类似的受HBV感染行为。 整个实验分为两大部分： （1）原代肝细胞的分离与培养 （2）寻找与确定高效率的感染途径 实验首先用原位灌注法获得小鼠肝细胞、树鼩肝细胞，继而在含10％的胎牛血清的DMEM细胞培养基中建立相关细胞培养体系，细胞贴壁效... 

【文章来源】：湖南农业大学湖南省

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
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英文摘要
第一章 前言
第二章 胶原酶原位灌注法分离原代肝细胞系统的建立
    1. 材料与方法
    2. 结果与讨论
    3. 小结
第三章 小鼠原代肝细胞的体外培养
    1. 材料与方法
    2. 结果与讨论
    3. 小结
第四章 与HBV感染肝细胞效率相关因素的确定
    1. 材料和主要试剂
    2. 方法
    3. 结果与讨论
    4. 小结
全文结论
参考文献
致谢
作者简历



本文编号：2956998