血管内皮生长因子单链抗体在大肠埃希菌中的高效表达

发布时间：2021-01-08 01:36

　　以血管内皮生长因子单链抗体（pTA-anti-VEGF-scFv）为研究对象,考察不同培养基配方和培养条件对血管内皮生长因子单链抗体表达量的影响。经均匀设计试验,确定工程菌R22-4高效表达重组抗体的最佳培养基为以2×YT培养基为基础,添加质量分数为0.3%葡萄糖、1.0%酪蛋白胨、0.4%玉米浆、0.133%KH₂PO₄、0.159 6%K₂HPO₄、0.532%NaCl、0.01%微量元素、0.04%维生素B₁;诱导条件为30℃、0.1 mmol/L IPTG（异丙基硫代半乳糖苷,Isopropylβ-D-Thiogalactoside）诱导5 h。经ELISA （酶联免疫吸附测定,enzyme linked immunosorbent assay）检测,血管内皮生长因子单链抗体的表达量是原始对照组的2.27倍,实现了血管内皮生长因子单链抗体在大肠埃希菌中的高效表达。 

【文章来源】：微生物学杂志. 2019,39(02)

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 工程菌
        1.1.2 培养基及试剂
        1.1.3 仪器与设备
    1.2 方法
        1.2.1 标准曲线的绘制
        1.2.2 培养基类型的筛选
        1.2.3 培养基成分单因素筛选
        1.2.4 培养基优化研究
2 结果与分析
    2.1 标准曲线的绘制
    2.2 基础培养基的筛选
    2.3 培养基成分的筛选
        2.3.1 碳源的筛选
        2.3.2 氮源的筛选
        2.3.3 无机盐、微量元素和维生素的筛选
    2.4 诱导条件的选择
        2.4.1 最佳诱导时间的选择
        2.4.2 诱导剂浓度的优化
    2.5 均匀设计试验
3 讨 论



本文编号：2963645